bcr／abl mRNA融合转录本水平与慢性粒细胞白血病演变关系.pdfVIP

维普资讯 检验医学与临床2008年 3月第 5卷第 6期 IabMedClin，March2008·[】l ， bcr／ablmRNA 融合转录本水平与慢性粒细胞 白血病 演变关系 王宇军，郭晓堵 ，季素芳 ，孙 利 (浙江省嘉兴市第一医院血液科 314001) 【摘要】 目的 检测不 同病程慢性粒细胞 白血病 (CMI)bcr／ablmRNA融合转录本表达水平 ．评价其在推断 CMI病情演变价值 。方法 利用定量聚合酶链反应 (PCR)检测患者不 同病期骨髓 个核细胞 bcr／ablmRNA融 合转录本水平。结果 健康对照组 0，CMI慢性期 0．34±0．03．慢性期治疗后 0．10±0．03，加速期 0．35土0．02，急 变期为 0．35±0．03，慢性期治疗前后差异无统计学意义 ，慢性期明显低于加速期和急变期。结论 bcr／ablmRNA 表达水平 的改变与疾病演变关系密切 。 【关键词】 荧光定量聚合酶链反应 ； 融合基 因； 慢性粒细胞 白血病 中图分类号 ：R552 文献标志码 ：A 文章编号 ：l672—9455(2008)0634502 95 的慢性粒细胞 白血病 (CMI)和 25 ～3O 的成 人急 果见 表 l。 性淋 巴细胞 白血病 中，第 9号染色体长臂和第 22号染色易位 t 表 l 各组标本的 bcr—ablmRNA表达情况 (9；22)，导致染色体病变 。这个 易位可 以通过细胞遗传学方 法 、Southern杂交或 PT_PCR检测到。然而 ，这些方法 中有 的 无法进行定量 ，有 的灵敏度有 限，因此对于预测 CMI病情演 变帮助不大 。因此 ，建立一种 既可定量且灵敏的方法显然很有 注 ：一表示无数据 。 必要 。本文采用核 酸扩增 技术 中荧光定量 聚合酶链 反应 (PCR)技术来检测 CMI患者 bcr／ablmRNA 融合转录本水 实验结果表明 bcablmRNA表达水平初诊 、加速期 、急 平 ，旨在探讨其转录水平在预测疾病病程演变和判断预后 的价 变期治疗缓解后 ，明显高于慢性期 (PO．01)。各组间mRNA 值 。 表达量经 t检验 ，慢性期与初发期 、加速期 、急变期 比较差异有 1 资料与方法 统计学意义 (P0．01)。 1．1 一般资料 本 院1997～2003年确诊 的CMI患者 5l例 ， 3 讨 论 其中男 37例 ，女 l4例 。诊 断标准按照 《血液病诊断及疗效标 bcr／abl融合基因是 CMI白血病细胞特异的分子标志 。， 准》ll。另有 8例为非 CMI，抽取 0．5mI骨髓液月千素抗凝后 国内研究 bcr—abl融合基因由于存在不能定量和无法有效清除 置一8O℃冻存待检 。 扩增产物导致的气溶胶污染缺陷，实验结果难 以使人信服 。采 1．2 方法 取 0．5mL骨髓液置 37℃复融 ，用 NH C1溶液 用实时 RT—PCR荧光定量方法检测 CMIbcablmRNA，由于 扩增产物分析在统一反应管中完成 ，避免 r污染的可能，并采 破坏红细胞 ，重复离心后弃上清液 。取 l×l0 细胞 ，用 High 用基 因的定量而标化 ，消除了 RNA 提取过程 中提取效率 的误 IsolationKit提取 RNA，并严格按照试剂盒说 明书操作 。Bcr／ 差 ，使结果更贴近真实情况 。 abl试剂购 白罗 氏公司 ，严格按说 明书配置 RT—PCR反应体 本实验结果显示 CMI