核酶抗肿瘤／抗病毒研究进展.pdfVIP

维普资讯 检验医学与临床 2005年 4月第2卷第 2期 · 综 述 · 核酶抗肿瘤 ／抗病毒研究进展 吴凯峰 综述 骆云鹏 审校 【摘要】 核酶作为一种新型的靶向基因药物。主要针对基因表达发挥作用 ，为抗肿瘤和抗病毒治 疗提供 了新的方法 。它具有特异性高的特点，目前对于它的研究还刚刚起步 现将核酶在抗肿瘤 、抗 病毒中的研究状况作一综述。 【关键词】 核酶 ； 抗肿瘤 ； 抗病毒 自20世纪 20年代以来，人们普遍认为酶的本质 核酶在抗病毒中的研究 是蛋 白质 ，但后来研究发现核酸 同样具有催化作用， 因此这种具有催化活性的核酸小分子就被称为核酶。 1．抗人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficien— 其主要特点是能够特异性地结合并切割靶分子，并促 cyvirus，HIV)：迄今为止，尚无一种十分有效的药物 进靶分子 mRNA的裂解，而且裂解完毕后，可 自行脱 治疗 HIV感染患者。而核酶将很可能成为治疗 HIV 离，再和其他靶分子 RNA结合 。目前 ，抗病毒核酶主 感染患者的新型基因药物。1990年，Sarver等首次构 要是围绕病毒 mRNA和病毒基因组 RNA设计的，而 建了HIV核酶特异表达载体 ，以HIV一1的 gagRNA 抗肿瘤核酶则是针对过度表达的肿瘤相关基因mR— 为切割对象，结果显示 gagRNA 以及其编码的P24抗 NA设计 的。 原比对照细胞有明显降低 。接着 ，Yum等针对 pol基 因保守区序列设计了一种发夹状核酶 ，通过逆转录病 核酶 的类型及其作用机制 毒载体将核酶转导入 T细胞，结果表明这种发夹状核 1．核酶 的类型：20世纪 80年代早期 ，Cech及其 酶对 HIV一1的复制具有非常明显的抑制作用。1997 同事首次报道在去蛋 白条件下，四膜虫 26SrRNA前 年 ，有研究发现高加索人群对 HIV感染有着天然的 体可在体外 自我剪接，Mg’和‘外源性鸟苷为该反应 抵抗力。进一步研究表明其 CCR5基因发生 了缺失 ， 所必需。1983年，Guerrier等发现纯化 于大肠杆菌 由此而产生了一个无功能的受体。然而有趣的是，缺 RNaseP的RNA组分具有多次切割分子的能力。因 失并不引起机体免疫缺陷和其他临床症状 ，反而增强 此 ，该 RNA 可称得上是第一个真正意义上 的核酶。 了机体对 HIV 的抵抗力。因此 ，CCR5是核酶抗 随后 ，Forster等 ]提出的 “锤头状核酶”模型，为此后 H1V治疗的又一理想靶点。Bai等 ]以此为靶位点构 的研究提供了理论依据 ，即只要 了解底物 RNA 的系 建的三联体核酶 (R5RbzTM)转导 HOS．CD4／R5细 列结构性质，就可 以设计针对任何 RNA分子的核酶， 胞 ，可明显减少细胞表面CCR5表达，减少受 HIV感 为核酶基因治疗奠定 了基础 。根据反应特性，核酶可 染机会 。上述实验均表明核酶抗 HIV基因治疗是可 分为：(1)自我剪接型：如线粒体第 1组、第 2组 内含 行的。1997年，美国和澳大利亚核酶抗 HIV～l的 I期 子、四膜虫 rRNA等；(2)自我剪切型：如锤头状、发夹 临床试验取得了令人鼓舞的成果。实验表明，经核酶 状 、斧头状核酶等；(3)剪切型：如 RNaseP。 转导的T细胞在患者体内是安全的，而且细胞可以长 2．核酶的作用机制：核酶切割位点的识别序列为 期存活。2003年，核酶外周血淋巴细胞输注疗法的 I 5一GN(U，C)K(C，U，A)，以切割位点 GUC最 为常 期临床实验已开始并得到美国NIH的批准。 见。在识别位点方面，