江苏某奶牛场健康奶牛体内产志贺毒素大肠杆菌的分离鉴定及其对小鼠致病性的研究.pdfVIP

畜牧兽 医学报 2011，42(6)：830—837 Ac口 terinariaetZootechnicaSinica 江苏某奶牛场健康奶牛体 内产志贺毒素大肠杆菌 的分离鉴定及其对小鼠致病性的研究 薛 涛，顾丛丛，高 崧 ，焦新安 ，周 琼，张文俊 ，刘秀梵 (扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室，扬州 225009) 摘 要 ：通过对江苏省某奶牛场连续 6个月的定群、定畜跟踪调查，获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分 布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料 ，并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定 。基于本实验室 已经建 立的多重 PCR方法对 stxl、stx2、eaeA、ehxA共 4个基因进行检测 ，对检测出的阳性样品，非 O157STEC采用多重 PCR结合 CT—SMAC平板 的分离方法 ，而 O157STEC通过免疫磁珠结合 O157显色平板的分离方法 。结果表明， 该奶牛场 STEC的初筛率为 16．1 (112／696)，分离率为 1]．1 (77／696)。分离株属于 35种 0血清型和 6o种 ()：H血清型。该场的优势血清型为 04、026和 093，O157在该场存在 ，但并非优势血清型。77个分离株 中，stx2 基 因的检 出率为 68．8 ，远远高于其它毒力基 因，如 stx1(19．5 )、eaeA(11．7 )和 ehxA(20．8 )。该场分离到 一 些 O157和 026血清型的菌株 ，对小鼠具有较强的致病性 。奶牛是 sTEC的天然宿主 ，可健康带菌 。除了 ()157 STEC外，非 O157STEC中一些高致病力菌株对人类 的健康也存在威胁 。 关键词：产志贺毒素大肠杆菌；奶牛；多重 PCR；O抗原 H抗原；毒力基因 中图分类号：$852．612 文献标识码 ：A 文章编号 2O11)06—0830—08 IdentificationofShigaToxin。producingEscherichiacolifrom HealthyCattleinOneFarm ofJiangsuProvinceandTheirPathogenicityonMice XUETao，GUCong-cong，GAOSong ，JIA()Xin—an ，ZHOUQiong，ZHANGWen-jun。LIUXiufan (KeyLaboratoryofAnizrmlInfectiousDiseasesofMinistryofAgriculture，College o／’VeterinaryMedicine，gangzhouUniversity，Yangzhou225009，China) Abstract：Throughinvestigatingaherdofcattlefrom afarm inJiangsuProvinceforShigatoxin～ producingEscherichiacoli(STEC)overaperiodof6months，weobtainedtheinformationofthe epidemicity，persistenceanddiverseserotypesofSTEC inthisfarm andthepathogenicityofsome isolates．Polymerasechainreaction (PCR)thathadbeendevelopedin thislaboratorypreviously wascarriedouttodetectgenesofeaeA ，stx1，stx2，ehxA ．NonOl57STECwereisolatedbyusing multipliedPCR andCT—SMAC separation，andO157STEC wereisolatedbyusing immunomag neticcombiningChrom～Agar(CA)O157platesseparation from thePCR positivesamples．st；z； genesweredetectedin