齿状核红核苍白球路易体萎缩一例：临床表型与基因突变分析.pdfVIP

中国现代神经疾病杂志2010年12月第lO卷第6期 ChinJContempNeurolNeurosurg，December2010．Vo1．10．No．6 637 ． 论 著 ． 齿状核红核苍 白球路易体萎缩一例： 临床表型与基因突变分析 郝 莹 顾卫红 王国相 王康 金森 段晓慧 杨斯柳 【摘要】 目的 报告 1例齿状核红核苍 白球路易体萎缩(DRPLA)患者的临床特征和基因突变特 点。方法 采用聚合酶链反应对388例脊髓小脑共济失调患者(234例常染色体显性遗传家系先证者和 154例散发病例)进行初步筛查，对琼脂糖凝胶 电泳 中出现2条 电泳条带的样 品应用荧光标记毛细管 电 泳基 因片段分析方法进行脊髓小脑共济失调致病基因三核苷酸 (CAG)重复序列突变检测并精确计数 ， 最后经pUC18-T载体克 隆测序验证重复次数达异常范围的样本 。结果 仅发现 1例表现为轻度脊髓小 脑共济失调和可疑癫痼发作 的女性患者具有DRPLA基 因CAG重复扩展突变。基 因片段分析2个等位 基 因的CAG重复次数分别为 l4和54次，克隆测序重复次数为15和58次。其家系另2例成员均有癫痂 发作史，但无 明显共济失调表现。l9例无异常扩展样本基 因片段分析显示CAG重复次数为7～20次，其 中9次重复最为常见。结论 DRPLA可能存在临床变异。388例脊髓小脑共济失调患者中仅发现 1例 DRPLA，说 明该病在 中国共济失调患者 中相对罕见 。在重复突变检测过程 中，由于高度重复序歹可产 生局部二级结构 ，在复制过程 中可能会 出现DNA聚合酶 的滑动，从而导致扩增产物的不忠实 ，这一问题 在基 因片段分析和克隆测序 中均存在 ，且后者在操作过程 中还可能出现克隆过程 的不稳定，因此基于这 两种方法 的结果需要相互验证 。 【关键词】 基因； 三核苷酸重复； 突变； 脊髓小脑共济失调 DOI：10．3969／j．issn．1672—6731．2010．06．012 Clinicaland geneticstudyofone DRPLA case HAO Ying，GU Wei—hong，WANG Guo—xiang，WANG Kang，JlN Miao，DUAN Xiao．hui，YANGSi—liu．MovementDisorder＆NeurogeneticsResearchCenter,China． JapanFriendsh巾Hospital，Be ng100029，China Correspondingauthor：GUWei—hong(Email：jahe55．gu@v ．sina．com) 【Abstract】 0bjective To investigate the clinica1and genetic features of dentatorubral pallidoluysian atrophy (DRPLA)． Methods Thetrinucleotiderepeatsofspin0cerebe1larataxia (SCA) diseasegenesweredetectedbypolymerasechainreactionfPCR)initially in388SCA caseswhich included 234 caseswith autosomaldominantinheritance and 154 sporadiccases． Fragmentanalysiswith laser— inducedfluorescence in capillary electrophoresiswasperformedforthe sampleswith 2bandsdetectedby agarosegelelectrophoresis(AGE)．Therepeatnumbersofthepositiveorsuspicioussampleswereverified by thepUC18-T vectorcloningand sequencin