表面等离子体共振传感技术在高分子研究中的应用.pdfVIP

维普资讯 高 分 子 通 报 2004年4月 表面等离子体共振传感技术在高分子研究中的应用 许鑫华H，韩明川 ，陈 强，李冬光 ，姚康德 (1．天津大学材料科学与工程学院，天津 300072；2．南开大学生命科学学院，天津 300071) 摘要：介绍了表面等离子体共振(SPR)的基本原理和SPR传感器技术的应用现状，综述了SPR 传感器在高分子科学研究中的应用和发展前景。 关键词：表面等离子体共振；传感器；高分子 前言 1902年，w0od…在光学实验中发现了表面等离子体共振 (SPR)现象。1982年，Liedberg和 Nylander_2首次将SPR原理应用于传感器研究，1990年，首台商用SPR传感器面世。十几年来，基于 SPR原理的传感器及其应用研究获得长足的发展。由于检测过程具有实时、方便、快捷，无须标记、 可保持分子的生物活性等特点，SPR传感器首先在生命科学领域研究中获得广泛应用，特别是生物 分子间特异相互作用的研究。SPR传感器研究对象开始主要是蛋白质、多肽、DNA、RNA、抗体、抗 原、类脂、病毒、细胞、药物等 ，随着科学发展和技术进步，SPR传感器的应用已开始向其它领域扩 展，近几年，利用其在分子间相互作用研究上的特殊优势，已逐渐渗透到化学、化工、材料、食品、环 境等研究领域，在免疫检测、环境监测、材料的表面及界面、电化学聚合等研究方面得到应用。本文 主要介绍SPR传感器的原理，特别是在高分子科学研究中的应用进展。 1 基本原理 当光线从光密介质向光疏介质传播且入射角度在一定的范围时，在两种物质的界面将发生全 内反射。但是，光波的电场强度在界面处并不立即衰减为零，而是部分地进入光疏介质。在光疏介 质中，电场强度随入射深度呈指数衰减，形成消失波，消失波的有效深度一般为 100—200nm 。 当一束相干光透过玻璃或石英基体，照射到镀在该基体上的高反射金属薄膜时，金属与溶液的 表面电子被激发，产生振荡电荷，该电荷以向量形式沿表面运动，但不辐射能量，这就是表面等离子 体基元 。若金属膜的厚度在50nm左右，且在消失波的有效范围内，则消失波在金属与溶液的界 面仍起作用，当调整入射角()为一定值时，消失波与表面等离子体基元发生耦合，产生共振，入射 光的能量部分地转移给表面等离子体基元，使反射光的强度急剧下降，此时的入射角称为共振角。 共振角随金属膜表面的折射率变化而变化，这一变化又与金属表面结合的分子质量成正比 。当 金属膜表面附近的物质发生纳克数量级变化时，共振角即发生明显变化，SPR谱(反射光强度与入 射角的关系)非常灵敏地随之发生移动。因此通过SPR谱，即可对样品进行分析。SPR传感器原理 基金项目：教育部南开大学、天津大学共建科学技术研究重点项 目； 作者简介：许鑫华(1963一)男，天津市人，博士，教授，主要研究方向为有机光电信息材料、化学传感器等； *通讯联系人． 维普资讯 第2期 高 分 子 通 报 如图1所示。 2 SPR传感器用于生物大分子的研究 SPR技术在生物分子间特异相互作用研究中具有 独特的优势和特点，应用领域包括蛋白质相互作用分 析、DNA与蛋白质相互作用分析、蛋白质的构象、DNA 分子间的相互作用、药物与蛋白质的相互作用、药物筛 选及鉴定等 。利用SPR传感器进行免疫分析，可以 识别抗原的种类，测定抗原的浓度，进行抗体．抗原相 图1 SPR传感器原理示意图 互作用的动力学分析，获得动力学、热力学参数，并可 Figure1 Principleofsurfaceplasmon 进行抗原决定簇表型的分析。在蛋白质的相互作用研 resonancebiosenosrdetection 究中，通过动力学分析和蛋白质构象的分析，可获得结 合常数、解离常数，并可推测相互作用机理。此外，还可进行蛋白质和多肽、DNA和DNA的相互作 用的研究，DNA序列的测定