长春新碱与牛血清白蛋白相互作用研究.pdfVIP

第28卷，第6期 光谱学与光谱分析 O0 and 2 8年6月 SpectroscopySpcctralAnalysis June，2008 长春新碱与牛血清白蛋白相互作用研究 陈克海1，王玉莲1，郭 明3，郑学仿1’弘，唐 乾1，马君燕1，高大彬2 1．大连大学生物工程学院，辽宁大连 116622 2．辽宁省高校生物有机化学霞点实验室，大连大学，辽宁大连116622 3．大连大学环境与化学工程学院，辽宁大连116622 摘要利用紫外、荧光和圆二色光谱研究了不同温度下长春新碱(VCR)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相 K时，vcR与BSA的猝灭常数KⅣ分别为2．o×104， 互作用。通过荧光猝灭数据算得在296，303和310 1．7×104和1．5×104L·Inol-1，结合常数K。分别为1．5×104，9．5×103和4．9×103L·mol-1，结合位点 数分别为o．9786，0．949O和O．8911，表明VCR与BSA间具有较强的结合作用，但结合能随着温度的升 高而降低，是形成复合物的静态猝灭。圆二色光谱(CD)数据表明相互作用后BsA的二级结构发生了改变： Hoff方 BSA的口-螺旋的含量从33．5％下降到29．7％，p折叠的含量从13．6％升高到18．4％。通过Van’t 程，计算出热力学常数焓变(△H)和熵变(△S)分别为：一62．7kJ·mol-1和一129．38J·(rnorl·K)一，表 明氢键和范德华力在VCR与BSA结合中处于主导作用。 关键词长春新碱；牛血清白蛋白；紫外一可见光光谱；荧光光谱；圆二色光谱 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2008)06—1375一04 作用力类型。对探讨v(1R与BSA药物的作用机理可提供一 引 言 定的有价值的实验数据和理论依据。 长春新碱(vincristine，VCR)是从长春花中分离出来的 1实验部分 二聚吲哚类抗癌药物。它能与细胞中的微管蛋白结合，影响 细胞中纺锤体的形成，使有丝分裂停止于中期，主要被应用 1．1试剂和仪器 于治疗肿瘤疾病。 牛血清白蛋白(BsA)是血浆蛋白的主要成分。BsA中有(中国药品生物制品检定所)，三羟甲基氨基甲烷(T—s，华 美公司)。其他实验药品均为分析纯。实验用水为二次去离 两个色氨酸(Trp)，分别位于两个不同的域中，Tr矿134位于 子蒸馏水。JA暇)．560型紫外一可见光分光光度计(日本)， BsA的I域接近表面的一个疏水的腔中，Trp_214位于Ⅱ域 的内部，因此BsA属于内源性荧光物质。 BsA具有结合、转运脂肪酸、卟啉、胆红素等功能，能 圆二色分光光度计(日本)，JuL』坂)_F12型制冷和加热循环 与许多内源性物质和药物广泛结合[1]。研究药物与白蛋白的 器(德国，±o．01℃)；pH昏4酸度计(上海雷磁仪器厂)。 相互作用，对阐明药物在体内的转运、分布和代谢等具有重 1．2实验方法 要意义。光谱法是获得这类相互作用信息的一种方便、快捷 1．2．1荧光光谱的测定 mL5×lO-6 mol 方法。有关药物与BSA相互作用的研究已有报道[2刮。本实 取2．5 rno卜L-1的BSA溶液(用O．05