丽蝇蛹集金小蜂气味结合蛋白基因的克隆与序列分析.pdfVIP

环 境 昆虫 学 报 JournalofEnvironmentalEntomology，December2010，32 (4)：476-482 ISSN1674-0858 doi：10．3969／j．issn．1674—0858．2010．04．006 丽蝇蛹集金小蜂气味结合蛋 白基因的克隆与序列分析 朱家颖 ，杨 璞 ，吴国星 ，和秋菊 ，尹立红 ，熊忠平 (1．西南林业大学云南省森林灾害预警与控制重点实验室，昆明650224；2 中国林业科学研究院资源昆虫研究所，昆明650224 3．云南农业大学植物保护学院，昆明650201) 摘要：利用RACE技术，首次从丽蝇蛹集金小蜂 Nasoniavitripennis中克隆获得一个气味结合蛋 白全长 cDNA序 列。该基因全长553bp，开放阅读框 41lbp，3和 5端非编码序列分别为 13bp和 129bp。其推导的氨基酸序列 编码 136个氨基酸，推测编码蛋白质的分子量为 15．4kDa，等电点为8．76。 源性 比对分析发现，丽蝇蛹集金 小蜂气味结合蛋 白基因与现已报道的其它昆虫气味结合蛋 白基因在氨基酸水平上的相似性均低于 30％，拥有 6 个保守半胱氨酸位点等气味结合蛋白所具有的典型特征。系统进化树分析表明，丽蝇蛹集金小蜂气味结合蛋白 与意大利蜜蜂Apis zzra气味结合蛋 白2，3，4，5，6，7，8和 12聚为同一族，与意大利蜜蜂气味结合蛋 白 5，6和8的进化程度最近。RT—PCR分析表明，丽蝇蛹集金小蜂气味结合蛋白基因不仅在雌、雄成虫触角中高 度表达，而且在头部和足中有微弱表达。 关键词 ：丽蝇蛹集金小蜂 ；气味结合蛋 白；基因克隆；序列分析；组织表达 中图分类号 ：Q966 文献标识码：A 文章编号：1674—0858 (2010)04—0476—06 M olecularcloningand sequenceanalysisofodorantbindingprotein gene from Nason vitripennis ZHUJia-Ying ，YANGPu ，WUGuo—Xing，HEQiu—ju，YINLi—Hong，XIONGZhong——Ping (1．KeyI_aboratoryofForestDisasterWarningandControlofYunnanProvince，SouthwestForestryUniversity， Kunming65 24，China；2．Research Institute of ResourceInsects，ChineseAcademy of Forestry，Kunming 65O224，China；3．CollegeofPlnatProtection，Yurmna AgriculturalUniversity，Kunming650201，China) Abstract：Inthispaper，acDNA clonecodingodorantbindingproteinwasfirstisolatedfrom Nasoniavit— ripennisusingrapidamplificationofcDNAends(RACE)strategy．Thisgenewas411bpinfull—length withopenreading’frame(ORF)of411bp，containing3 and5 untranslatedregionof13bpand 129bp．ThededucedaminoacidsequenceofN．vitripennisodorantbindingproteinrevealedmaturepro- teinsof136 aminoacids．Itspredictedmolecularweightand isoelectricpointwere l5．4 kD and8．76． respectively．M vitripennisodorantbindingproteinsharedlow (below30％)aminoacididentitywith otherinsects odorantbind