浅谈洋桔梗的离体培养.pdfVIP

第37卷 福建热作科技 、，0ll37NO．1 第 1期 Fujian Science ＆ Technology of Tropical Crops 2Ol2 浅谈洋桔梗的离体培养 李尚旺 (福建省闽南花卉有限公司，漳州 363218) 摘要：介绍洋桔梗的离体培养方面的研究，主要是外植体的选择，不同基本培养基、激素、碳源对其不定芽诱 导、增殖与分化、生根的影响，以及幼苗移栽管理的方法等。并简介笔者的试验实践情况。 关键词：洋桔梗；离体培养：不定芽；生根；激素 中图分类号：Q943．1 文献标识码：A 文章编号：1006—2327一 (2012)O1—0o37—04 洋桔梗EustamagrandfiorumShinners别名草原龙胆、大花桔梗，为龙胆科草原龙胆属，1—2年生观 赏植物，原产地北美洲。其花形美丽，花姿优雅，花色多样，茎杆光滑挺直，叶片油绿，是最近几年渐 渐流行的鲜切花和盆载花卉。洋桔梗品种主要有单瓣品种和重瓣品种两大类，花冠形状多样，呈美丽的 杯状、钟状、漏斗状等，有粉红色、玫瑰色、紫色、白色、橘红色、蓝色及复色等颜色 l【】。近年来，我 国对洋桔梗的栽培面积越来越大，优质种苗的市场需求量不断增加，但其种子细dx(19ooo粒 )，传统上 都是用进 口的F1代种子进行繁殖，价格偏高，且种子繁殖后代变异较大，从发芽到正常生长需时较长， 幼苗死亡率高，导致育苗成本较高。因此，利用组织培养快速繁殖，一方面可以不受季节限制的大批量 生产优质种苗，另一方面叶片培养再生不定芽体系为通过基因工程技术改 良洋桔梗提供了受体系统。 1 洋桔梗的生物学特性及生长周期 1．1 生态习性 洋桔梗适宜的生长环境为温暖、湿润和阳光充足，但忌湿涝，适合生长温度为 15℃～28℃，生长 期的夜温不能低于 12℃。生长期水分不足，易引起茎叶生长细弱和提早开花；冬季低温寡照的情况易 引起花枝徒长且花期延迟；花蕾形成时忌高温、高湿，否则易引起真菌性病害。洋桔梗对光照反应敏感， 长 日照与短 日照环境提早花芽分化，花芽分化的最低温度为 13℃，日照至少 12h。洋桔梗喜排水 良好、 肥沃疏松的土壤，适宜土壤酸碱度为pH值6．5～7．0[2】。 1．2 生长周期 洋桔梗一般是秋冬季育苗，2—3月定植，6—7月可开花：7月播种，秋季定植，翌年4—6月开花。 2 外植体的灭菌、接种和不定芽的获得 洋桔梗用于组织培养的外植体可以是无菌种苗、叶片和茎段等。外植体在适宜的培养基经诱导都能 产生愈伤组织或不定芽。 2．1 种子培养诱导不定芽的产生 2．1．1 种子无菌播种 将洋桔梗的种子用纱布包裹，饱和洗涤液浸5—10min，自来水冲洗5—10min，在超净台上用70％ 酒精浸50—60S后，用0．1％氯化汞浸泡 5—10min，用无菌水冲洗5次，每次2—3min，便可进行接种 [31 。 2．1．2 培养条件 种子萌发的培养基为MS培养基+6一BAO．5mg／L+NAA0．05mg／L+GA0．5mg／L，加琼脂0．7％，蔗糖 3％，调节pH值为5．8。培养温度25+1℃，光照强度约为2500Lux，光照 12h／d。 37 第 37卷 福建热作科技 Vo1．37No．1 第 1期 Fujian Science ＆ Technology ofTropical Crops 2012 2．1．3 生长与分化 将消毒的种子接种在培养基上，培养 lO天左右，种子逐渐膨大形成～小团愈伤组织，20天时，愈 伤组织上分化出小芽点。40天时，将分化出的小芽点切成 0．5cm2左右的小块，接种到 MS培养基 +6一BA0．5mg／L+NAA0．02mg／L上进行不定芽诱导4【】。 2．2 叶片培养不定芽的产生 2．2．1 获取无菌材料 将种子培育出的无菌苗，经继代增殖后，为了消除原来培养基中激素的不 良影响，切取