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32 1 ( ) Vol. 32 No. 1
第 卷第 期 中南民族大学学报 自然科学版
20 13 3 Journal of South-Central University for Nationalities (Nat. Sci. Edition) Mar. 20 13
年 月
谷氨酰胺转胺酶在毕赤酵母菌的初步表达
, , ,
何冬兰 叶 程 王亚南 覃 桂
( , 430074)
中南民族大学生命科学学院 武汉
pPIC3. 5k-MTG / DH5 pPIC3. 5k-MTG , Sac I
摘 要 从重组菌株 α 提取重组质粒 经 酶切线性化处理后纯化重组质
, , SDSP. p astoris GS115 TGase
粒电击转化到毕赤酵母菌中 用甲醇诱导表达 经 鉴定重组质粒 成功表达出了
, , 47 kD , 0 . 50 U / mL.
蛋白 并初步纯化获得了较纯的目的蛋白 其表观分子量为 酶活为
; ;
关键词 谷氨酰胺转胺酶 毕赤酵母 表达
中图分类号 Q556 文献标识码 A 文章编号 1672-4321 (2013)01-0032-04
The Preliminary Expression of Transglutaminase Gene in p ichia p astoris
He Donglan ,Ye Cheng ,Wang Ya nan ,Qin Gui
(College of Life Sciences ,South-Central University for Nationalities ,Wuhan ,430074 ,China)
Abstract Reconstructed expression plasmid pPIC3. 5k-MTG was obtained from recombinant strain pPIC3. 5k-MTG /
DH5α. After lineared by Sac I digesting ,plasmid was transformed into p ichia p astoris GS115 through electroporation. The
recombinant P. p astoris GS115 was inducted by methanol. SDSanalysis showed that the recombinant P. p astoris
GS115 expressed tracelular protein with apparent molecular weight of 47 kD and enzyme activity of 0 . 50 U / mL by
preliminary purification.
Keywords MTG ;p ichia p astoris ;expression
20 90 , pPIC3. 5 k-MTG ,
世纪 年代 国外学
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