食品中四种糖的含量测定.docVIP

应用报告 LC005 饮料中四种糖的含量测定 1 实验部分 1.1 仪器检测器P1600高压恒流泵标准品(9%，国药试剂)；乙腈(色谱纯)；二次蒸馏水。 ml、1.00 ml、2.00 ml、3.00 ml、5.00 ml于10ml容量瓶中，加水定容至刻度，分别得浓度为1.0mg/ml、2.0mg/ml、4.0mg/ml、6.0mg/ml、10.0mg/ml的混标标准溶液。 3）乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。 4）亚铁氰化钾溶液：称取10.6g铁氰化钾溶液，加水溶解并稀释至100ml。 1.3 样品前处理 含有二氧化碳的饮料，参考GB/T 22221—2008进样样品前处理。 精密量取除了CO2的样品5ml，移入10ml的容量瓶中，缓慢加入乙酸锌和亚铁氰化钾溶液各0.5ml，放置室温后，用水定容至刻度，摇匀，静置30min，用干燥滤纸过滤，取2ml滤液，过0.45um微孔滤膜，作为待测样品溶液。 1.4 色谱条件： 色谱柱：Shodex NH2P-50（4.6×250mm） 流动相：乙腈/=75/25 流速：1.0ml/min 柱温：30℃ 进样量：5ul 2 实验结果考察分析方法在同浓度水平分析的精密度。 6716.4 9.586 5828.7 13.505 7405.9 16.44 5590.6 2 7.394 6873.8 9.586 5673.2 13.522 7285.8 16.423 5396.1 3 7.402 6710.15 9.595 5776.5 13.547 7499.7 16.448 5640 4 7.394 6958.4 9.595 5918.4 13.513 7467.2 16.432 5630.7 5 7.327 6675.05 9.47 5659.6 13.388 7169 16.423 5713.8 RSD/% 0.42 1.81 0.57 1.88 0.46 1.45 0.06 2.13 图1 标准品HPLC谱图 标准曲线 1427.4 1983.7 1513.8 2.0 3489.62 2965.23 3714.17 2848.63 4.0 6734.05 5497.75 6783.8 5183.1 6.0 10215.13 8349.7 10763.1 7922.45 10.0 17249.2 14148.8 17957.2 13278.7 通过线性回归，以峰面积-浓度作图，分别得到四种糖的回归方程如下： 果 糖： y=1721.8X-39. 9 R=0.9999 葡萄糖： y=1405.2X＋13. 9 R=0.9998 蔗 糖： y=1780.6X＋49. 4 R=0.9994 麦芽糖： y=1305.3X＋145.0 R=0.9997 加样回收率和重现性实验 取已知含量的样品，加入浓度为10.0mg/ml的混合标准品溶液1 ml，按“样品前处理”?操作，平行制备3份，得到样品溶液后按上述色谱条件进样分析，得到加样回收率及重现性结果。 表3.加样回收率及重现性测定结果 果糖 样品中含量/mg 加入标准品实际量/mg 测定含量 /mg 加入标准品计算/mg 加样回收率/% 1 22.2 10.0 32.2 10.0 100.0 2 22.2 10.0 32.5 10.3 103.0 3 22.2 10.0 32.3 10.1 101.0 平均值% 101.3 RSD% 1.51 葡萄糖 样品中含量/mg 加入标准品实际量/mg 测定含量 /mg 加入标准品计算/mg 加样回收率/% 1 26.9 10.0 36.5 9.6 96.0 2 26.9 10.0 36.7 9.8 98.0 3 26.9 10.0 36.5 9.6 96.0 平均值% 96.7 RSD% 1.19 蔗糖 样品中含量/mg 加入标准品实际量/mg 测定含量 /mg 加入标准品计算/mg 加样回收率/% 1 0 10.0 10.00 10.00 100.0 2 0 10.0 9.85 9.85 98.5 3 0 10.0 10.31 10.31 103.1 平均值% 100.5 RSD% 2.33 麦芽糖 样品中含量/mg 加入标准品实际量/mg 测定含量 /mg 加入标准品计算/mg 加样回收率/% 0 10.0 10.09 10.09 100.9 2 0 10.0 10.18 10.18 1