禁饲和重新饲喂对鸡骨骼肌中MAFbx和MuRF1基因表达水平的影响.pdfVIP

中国科学：生命科学 2011年 第41卷 第 12期：1162 1166 《中国科学》杂志社 SCIENTlASINICA Vitae WWW．scichina．com Iife．scichina．com SCIENCECHINAPRESS 禁饲和重新饲喂对鸡骨骼肌中MAFbx和M#RFI 基因表达水平的影响 李庆贺①，李金秀①，兰鹤①王楠②，陈黎③，胡晓湘①，李宁① ① 中国农业大学生物学院，农业生物技术国家重点实验室，北京 100193 ② 中国农业大学动物医学院，北京 100193； ③ 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所，杭州 310021 联系人，E—mail：ninglbau@public3_bta．net．cn 收稿 日期：2011-06．28；接受 日期：2011-08—01 北京市 自然科学基金(批准号：6081003)资助项 目 摘要 对禁饲和重新饲喂对鸡骨骼肌中蛋白酶体相关基因及其下游靶基因表达水平的影响 关键词 进行了研究．MAFbx和MuRF1基因作为泛素．蛋白酶体系统的E3连接酶发挥生物学作用．对七 禁饲 基 因表达 日龄鸡分别禁饲24，48和48h后重新饲喂4h．测定了上述两个基因mRNA和蛋白质水平的表 MAFbx 达．MAFbx和MuRF1的表达量随着禁饲时间的延长而上升，并且这种上升趋势随着重新饲喂 MuRFl 而下调．同时测定了上述两种E3连接酶的靶蛋白，即MyoD和M—CK的表达量，这两种蛋白的 MyoD 表达量随禁食的延长而下降，并且这种下降趋势会被重新饲喂所阻止．这些结果表明，禁饲促 M ．CK 进 了MAFbx和MuRF1的表达，并可能导致相应靶蛋白的减少． MAFbx(musclea~ophyF—box)~ MuRF1(muscle 胞外和细胞 内的蛋 白质降解 ．细胞外和细胞膜上的 RINGfinger1)是两个编码 E3泛素连接酶的基因，在 蛋白质是被包含数种酸性蛋 白酶和水解酶的溶酶体 泛素介导的蛋白酶体引起 的蛋白质降解中发挥作用． 蛋白水解系统所降解 【．在另一个蛋白质降解系统中， MAFbx，又称为atroginl或Fbxo32，是典型的包含一 胞内蛋 白质在 E3泛素连接酶的催化下，首先在底物 个F—box区域SCF类型的E3泛素连接酶llI2】．MuRF1 蛋白上共价连接一个含有 76个氨基酸的泛素蛋 白作 是肌 肉组织特异性的环指蛋 白，可以和半胱氨酸．组 为降解的标记，泛素蛋 白和底物蛋 白由底物蛋 白上 氨酸一锌结合模体结 引．MAFbx和MuRF1在心脏和 的赖氨酸的 氨基与泛素蛋白的 c端所形成的异肽 肌 肉组织中特异性表达，并且在肌 肉消耗时蛋白质 键所连接．更多的泛素分子附着于前一个泛素分子 降解过程中扮演重要角色_4】．多项研究表 明，这两个 上，在靶蛋白上形成一条泛素链，该泛素链可被 26S 基 因的表达在肌肉消耗过程中(如肌 肉萎缩、损伤 、 蛋 白酶体识别并 降解成许 多小肽 6【j．MAFbx和 烧伤、老化、慢性疾病及饥饿)有所上调I1j’。J． MuRF1参与很多蛋 白质 的降解，特别是肌 原纤维 在生物体内蛋 白质主要通过两个系统 降解，即 蛋 白[81． 溶酶体系统和泛素一蛋白酶体系统，它们分别控制细 在哺乳动物体 内，骨骼肌是最主要的蛋白储藏 中国科学：生命科学 2011年 第41卷 第 12期 库．骨骼肌蛋 白可 以转化为 自由氨基酸用于肝糖原 5．AGGCCGCAGTGTGTTGTTCT．3．，下游引物：GT— 的合成，并在饥饿和疾病情况下供能L5J．禁饲增加了 GTGAATGGCT