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浙江农业学报
周晓薇朱雪蛟田玲等耐热 聚合酶的酸酐修饰及其在降低 非特异性扩增中的应用评价 浙江农业
学报
耐热 聚合酶的酸酐修饰及其在降低 非特异
性扩增中的应用评价
周晓薇朱雪蛟田 玲曹 林
南京农业大学食品科技学院江苏南京 南京农业大学动物医学院江苏南京
摘 要酸酐能与聚合酶上的赖氨酸结合形成聚合物试验通过选用合适的酸酐修饰聚合酶 在
常温下酶活性被封闭升温过程中不表现酶活从而减少非特异性扩增和引物二聚体的形成而在较高的温
度下一段时间后一般为 酸酐脱落聚合酶得以恢复正常的扩增活性从而实现反应的热
启动 由此建立的热启动体系灵敏度高可以检测到 个拷贝的分子较普通体系提高了
个数量级 此方法较其他方法操作简单成本低廉且所得的热启动聚合酶稳定性好便于保存其
灵敏性与特异性也更高这种通过化学修饰形成的复合物达到热启动 目的的方法的建立具有着重要
的意义是提高灵敏度和特异性的重要方法之一
关键词热启动聚合酶化学修饰
中图分类号 文献标志码 文章编号
收稿日期
南京农业大学青年科技创新基金资助
基金项目
周晓薇 女主要从事生物工程研究
作者简介
通讯作者曹林
周晓薇等耐热聚合酶的酸酐修饰及其在降低非特异性扩增中的应用评价
聚合酶链式反应 盐去除多余酸酐低温冷藏
技术目前被广泛应用于 分子的扩增 模板的制备
其中 聚合酶是实现 复制的关键 参照文献 的方法
聚合酶是一种从水生栖热菌 的制备
中分离得到的耐热的 聚合酶
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