镇痛汤镇痛作用的药效物质基础研究.pdf

摘要 摘要 镇痛汤系河南中医学院尚炽昌教授的临床经验方，由元胡、乌头等四味 中药组成，临床上用于治疗癌症中晚期引起的疼痛，具有较好的疗效 为了 阐明镇痛汤临床产生镇痛疗效作用的物质基础，为研究开发国家二类新药奠 定基础，我们采用现代中药化学研究方法对其进行了研究丫论文内容分为四 章: 第一章 对巧年来有关中药复方药效物质基础的国内外研究进展。包括 新思路与假说、研究方法和途径进行了综述，综述了镇痛汤的研究进展。 第二章在药理学实验证明镇痛汤全方混煎汤剂有效及水煎液的氯仿萃 取部位为有效部位的墓础上，对镇痛汤水煎液的氯仿萃取部位中的化学成分 进行了研究。冬用硅胶柱层析结合制备薄层层析，从中分离得到鉴定了6‘ 个单体化合物，经化学与波谱分析鉴定并与标准化合物对照，它们的结构分 别确定为紫笙碱、四氢巴马丁、海婴粟碱、四氢黄连碱、四氢非洲防己碱、 氢化小璧碱、普托品、a一别隐品碱、隐品碱、15一去氧乌头次碱、新乌头碱、 乌头碱、次乌头碱、0一香树脂醇、a一谷凿醇、阿魏酸。并确定了上述化合 物来源: 紫莹碱、四氢巴马丁、海婴粟碱、四氢黄连碱、四氢非洲防己碱、氢化 小聚碱来源于延胡索。 阿魏酸来源于酸枣仁。 15-去氧乌头次碱、新乌头碱、乌头碱、次乌头碱来源于草乌。 普托品、a一别隐品碱、隐品碱在延胡索与咽喉草中均有存在。 。一香树月旨醇、。一谷*醇在植物中广泛存在步 第三章 采用体内药理学实验对镇痛汤及其不同部位的镇痛作用和有效 部位的急性毒性实验进行了研究 验结果表明:镇痛汤可以显著减少醋酸 所致小鼠扭体反应次数，延长小 现扭体反应的潜伏期，能够显著提高小 鼠热板法痛阂值，提示镇痛汤具有显著的镇痛作用。通过对其不同部位镇痛 作用观察，发现 CHC13部位能显著延长酷酸致小鼠扭体反应潜伏期，减少 15min内扭体发生次数，提高小鼠的热板法痛阂，提示镇痛汤起镇痛作用成 分存在于CHC13部位。镇痛汤有效部位的小鼠LDsu447mg/kg(腹腔注射)、 \ 叼 / 995mg/kg(口服) 第四章 建立了镇痛汤有效部位群的Rp-HPLC化学成分谱。 谱条件:色恤 谱柱:ShimpackCLC-ODS柱，6.0x150mm.流动相:甲醉 水一三乙胺 70:30:0.15，检测波长:280nm，流速1.0ml/min;柱温25C,通过与单体 化合物色谱峰保留时间比较，对供试样品色谱图中 12个色谱峰进行了确 认。并考察了3批样品的HPLC色谱图中5个主要的色谱峰峰面积的RSD, 第五章 考察了镇痛汤有效部位中主要活性成分的分析方法。采用Rp-HPLC 方法对镇痛汤有效部位中主要活性成分四氢巴马丁、四氢非洲防己碱、延胡 镇痛汤镇痛作用的药效物质墓础研究 索乙素的含量进行了测定，对其方法学进行了考察;对镇痛汤有效部位中主 要活性成分之间的含量比关系及色谱峰进行了考察和确认。色谱条件:色谱 柱:ShimpackCLC-ODS柱，6.0x150mm。流动相:A:甲醇一水一三乙胺 60:40:0.15,B:70:30:0.15;检测波长:280nm，流速 0.7ml/min,;柱 温 350C。延胡索乙素在 。.586-2.93Ng范围之间具有良好的线形关系，镇 痛汤有效部位中延胡索乙素的含量为 4.63%;四氢非洲防己碱在 0.952- 4.76wg范围之间具有良好的线形关系，镇痛汤有效部位中四氢非洲防己碱 的含量为10.37%;普托品在2.32-11.61,g范围之问具有良好的线形关系，镇 痛汤有效部位中普托品的含量为14.59%.HPLC色谱图中6个主要的峰面积 比约为 6.7士0.8:2.0士0.2:1.0士0.1:4.2士0.3:10.0士1.1:2.0士 0.22:1,通过与四氢非洲防己碱等类似结构的生物碱的含量比较，初步结 果显示已分到的成分在有效部位群中的含量达到500%以上。 上 研究结果表明，镇痛汤镇痛的药效物质基础存在于其汤剂的氯仿萃 取部位 该部位所含生物碱类成分具有显著的镇痛活性，由上述成分构成的 部位群