食品加工卫生表面取样技术方法.docVIP

前 言 本标准等同采用BS ISO 18593:2004 Microbilolgy of food and animal feeding stuffs- Horizontal methods for sampling techniques from surfaces using contact plates and swabs。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由福建出入境检验检疫局、山东出入境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：郑晶、郑麟毅、陈舒奕、雷质文、吴文凡、黄菁菁、陈俊玉、陈彬、林杰、黄晓蓉。 食品加工卫生表面取样技术方法 ℃培养48±2 h。 8.2 拭子法（含布料和海绵法） 8.2.1 平板法 用混匀器将含有拭子的试管完全混匀30 s，调节混匀速度使试管中的液面高出底部2 cm至3 cm。 根据擦拭的面积，在装有布料或海绵的塑料袋中加入一定量（如每100 cm2加入100 mL）的稀释液或中和液（4.1），用蠕动式均质器处理1 min，或用平摇式均质器振动30 s，制成原液。若擦拭好的布料或海绵是置于灭菌容器中，则在容器中加入量的稀释液或中和液，盖紧容器，在保证液体不泄漏的条件下混匀30 s。 如果预计微生物的数量较多，可按GB 4789.2中的10倍梯度稀释步骤，用蛋白胨水对原液进一步10倍稀释至可计数的梯度。 根据选择计数方法，取1 mL原液加入培养皿用于平板倾注计数，或取0.1 mL加入含计数培养基的培养皿进行涂布。每个稀释度均按此法操作，每个稀释度做两个平行，在琼脂表面干燥前保持平皿处于水平位置。待琼脂表面干燥后，翻转培养皿，36±1℃培养48±2 h。 也可用滴板法替代上述平板法。 8.2.2 滴板法 从最高浓度开始，用无菌吸管吸取0.05 mL整数倍的原液或稀释液（拭子、布料或海绵法）加入含有培养基且底部已做好标记的平皿并涂布，每个稀释度做两个平行，在琼脂表面干燥前保持平皿处于水平位置。待琼脂表面干燥后，翻转培养皿，36±1℃培养48±2 h。 8.2.3 指定微生物的定性检测 按照相应检测标准的程序对原液进行增菌、分离培养和鉴定。 8.3 菌落的计数和检测 8.3.1 接触板法 培养时间结束后，计算接触板或玻片上的典型菌落数，必要时对目标微生物进行确认。 8.3.2拭子法（含布料和海绵法） 计算每个平板上的的菌落数，必要时对目标微生物进行确认。 8.3.3 滴板法 选取菌落数在5～50CFU/cm2。 9.2 拭子法（含布料和海绵法） 9.2.1参照有关标准计算CFU）数N。 9.2.2 用以下公式计算被测表面每cm2的CFU数NS 其中： N —— 1 mL稀释液（或中和液）中的CFU数 F —— 试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，以毫升计 A —— 表面取样面积，以cm2计 D —— 计数所用稀释度的倒数 9.2.3 若用滴板法，按以下公式计算每毫升悬浊液中所含的CFU数N 其中： ∑C —— 所选择的两个稀释度的菌落数总和，其中一个稀释度的菌落数至少为5 V —— 每滴接种液体的量（本方法的情况下为0.05 mL） n1 —— 第一稀释度的液滴数 n2 —— 第二稀释度的液滴数 d —— 第一稀释度的稀释因子 用以下公式计算每平方厘米的菌落数NS 其中： N —— 每毫升原液中所含的CFU数 F —— 试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，以毫升计 A —— 擦拭取样面积，以cm2计 9.2.4 如果擦拭区域未明确规定，用以下公式计算每个拭子的CFU数NSW 其中： N —— 每毫升原液中所含的CFU数 F —— 试管或均质袋中含有稀释液（或中和液）的量，以毫升计 D —— 计数所用稀释度的倒数 使用半定量法时，得出的表面每平方厘米的CFU结果可用于卫生学计分，分数范围根据被测表面而变化。 10 结果报告 10.1 根据计算的结果，以CFU/cm2为单位报告测试表面的菌落数； 10.2 当擦拭区域面积不明确时，结果可以CFU/拭子为单位来进行报告； 10.3当对指定微生物进行定性检测时，结果报告擦拭区域目标微生物是否检出，如果区域未知，则以每个拭子为单位报告结果。 10.4由于接触板法和拭子/布料法得出的结果一般不同，在报告中必须说明采用何种方法。 SN ××××—×××× SN ××××—×××× 1 SN ××××—×××× SN /T××××—×××× II 1 4 5 SN 中华人民共和国质量监督检验检疫总局 发布 ××××-××-××实施 ××××-××-××发布 食品加工卫生表面取样技术方法Indus try (BS ISO 18593:2004,Microbilolgy of food and animal feeding s