斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范 编制说明.docVIP

《斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范（征求意见稿）》 编制说明 1 基本信息 1.1 标准草案名称 中文 斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范 英文 Quarantine protocol for channel catfish virus disease 1.2 与国际标准和国外先进标准一致程度情况 等同 修改√ 非等效 标准号 英文名称 Manual of Diagnostic Tests for Aquatic animals （2006） 中文名称 《OIE水生动物疾病诊断手册》（2006） 1.3 任务来源 批准立项的文件名称和文件号 关于下达2012年第一批出入境检验检疫行业标准制(修)订计划项目的通知国认科函[201]36号2012B036 1.4 制（修）订情况 制订√ 修订 替代的标准编号 1.5 起止时间 2012年3月1日～2013年12月31日 1.6 起草单位 中国检验检疫科学研究院、北京出入境检验检疫局、 1.7 起草人 张旻、郑晓聪、王娜、张利峰、景宏丽江育林 1.8 专业类别 1、食品（化妆品）检验；2、卫生检疫；3、动物检疫；4、植物检疫； 5、纺织产品检验；6、轻工产品检验；7、机电产品检验；8、化工、矿产品和金属材料检验；9、管理；10、鉴定；11包装及危险化学品 1.9 标准体系表代码 1.10 调整情况 无 2 背景情况 2.1 目的、意义 斑点叉尾鮰病毒病（CCVD）曾是OIE水生动物疫病名录的必报疫病。该病病原为斑点叉尾鮰病毒（CCV），感染鮰鱼，幼鱼和鱼苗的发病死亡率可达100%，因此也被我国农业部列为二类疫病。20世纪60年代在美国最先发现其流行，洪都拉斯和俄罗斯也有报道。目前主要在北美地区流行。由于我国和北美有水产贸易往来，因此该病严重威胁我国的鮰鱼养殖业和进出口贸易。本项目计划根据OIE水生动物疾病诊断手册（2006）推荐的方法，制定CCVD检疫技术规范，为我国进出口鱼类提供检疫标准。 2.2 与国内外相关标准、文献的关系 目前我国已制定国家标准《鱼类检疫方法，第4部分：斑点叉尾鮰病毒》（GB/T15805.4-2008）。国标引用了OIE水生动物疾病诊断手册推荐的病原分离、中和试验和PCR方法本项目所起草的标准同样根据OIE水生动物疾病诊断手册（2006）中所推荐的方法制定。相对于国标，本项目加入了ELISA检测方法。 3 编制过程 3.1 准备阶段（可选项） 本实验室从ATCC购买了CCV标准毒株，并拥有CCV的敏感细胞系CCO，建立了CCV病毒的分离和增殖体系，为建立和完善疫学检测方法打下基础。 3.2 分工情况 张旻：主持起草分子生物学方面的工作景宏丽细胞生物学方面的工作张利峰免疫学方面的工作 3.3 标准草案编写情况 根据国家认监委下达的任务。由中国检科院动检所负责检疫标准《斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范: 2012B036），通知要求在2013年12月以前完成。 《斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范 3.4 征求意见情况（适用于送审稿） 总共有10家检验检疫局为本标准提供了26条修改意见。意见基本集中于格式问题和文字表述问题。本标准已采纳汇总了修改意见，并按照意见对标准进行了修改，形成了送审稿。 3.5 审定情况 （适用于报批稿） 3.6 预期的管理目标（适用于规程类标准）或技术指标（适用于方法类标准） 4 主要技术内容的确定 《斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范》采用了OIE水生动物疾病诊断手册（2006）中所推荐的病分离、中和试验、ELISA和PCR方法制定标准并总结我国在这一领域的实践经验，方法水生动物疾病诊断手册（2006） H2O2去除非特异性过氧化物酶的步骤，以消除假阳性；修改了ELISA检测流程中PBST的洗涤次数；增加了酚氯仿法抽提病毒核酸的内容，使PCR样品DNA含量更高更纯；增加了高分辨率琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物的内容，较OIE推荐的聚丙烯酰胺凝胶电泳步骤简便。其它步骤基本按照OIE的内容撰写。 5 验证情况（适用于方法类标准） 5.1 验证单位情况 验证单位 验证人员 验证时间 北京出入境检验检疫局 张利峰 研究员等 2013年9月30日 北京市水产技术推广站 徐立浦 研究员等 2013年9月30日 山东出入境检验检疫局 岳志芹 研究员等 2013年9月29日 5.2 验证过程 把内控DNA和CCV基因组DNA给北京局、山东局和北京市水产技术推广站，按照标准所描述的方法来重复验证。 5.3 验证数据分析 得到的结果和标准征求意见稿所述的结果一致。 5.4 验证评价 《斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范》标准（征求意见稿）适合用