人乳头状瘤病毒（HPV）疫苗的 最新研究进展.docVIP

人乳头状瘤病毒（HPV）疫苗的 最新研究进展 王小兵??? ? 张伟 中国协和医科大学 中国医学科学院 肿瘤研究所生物检测中心 摘要：人乳头状瘤病毒（HPV，human papillomavirus）感染是宫颈癌的主要病因。清除HPV感染和阻断由HPV感染所引发的宫颈癌前病变的进展尚缺乏理想的方法。目前，国际上已有20多种HPV相关疫苗已进入动物和临床试验阶段，主要分为预防性疫苗和治疗性疫苗，主要制剂形式是蛋白质、核酸。动物实验和临床试验结果显示HPV疫苗将在预防HPV感染及治疗由感染所引起的相关疾病方面将有重要作用。关键词： 人乳头状病毒 疫苗 进展中图分类号：R730.7 ???? ?????? 文献标识码 A ??? ? ? 人乳头状病毒是一种无包膜的DNA病毒，目前已发现100多型别，主要感染生殖道粘膜和口腔、咽部上皮粘膜细胞等，是宫颈癌的主要病因，在我国妇女宫颈癌组织中HPV感染率大于95%，其中高危型HPV如16、18型占90%以上，世界范围内每年有40万新发宫颈癌病例，20万人死于该病[1]。HPV感染与宫颈上皮不典型增生及粘膜生殖道尖锐湿疣发病关系密切。因此，研制HPV疫苗来预防HPV感染和治疗HPV感染引起的相关疾病对于保护广大妇女身体健康具有重要价值。一. HPV疫苗的分型1． HPV疫苗可分为预防性和治疗性两种类型?? 1.1 HPV预防性疫苗:可阻断HPV感染皮肤和粘膜，一般由病毒衣壳蛋白L1或L1+L2组成，在细胞内可自我组装成空心病毒样颗粒（VLPs）[2]，它具有与完整病毒相同的抗原空间表位，可激发机体的CD4+淋巴细胞介导的体液免疫反应，刺激机体产生保护性中和抗体。预防型疫苗种类较少，主要以HPV病毒的结构蛋白质形式存在。 ? 1.2 HPV治疗性疫苗：可清除由HPV感染所引起的肿瘤残存病灶、宫颈不典型增生（CIN）及生殖器尖锐湿疣，阻断低危型病变向高危型及癌症的转变过程。主要分为蛋白质疫苗和基因疫苗。HPV引发上皮细胞的转化并最终导致癌变主要由于HPV转化基因E6、E7造成，E6可诱发P53的降解，E7可抑制Rb的抑癌功能。实验证实在宫颈上皮细胞发生癌变的整个过程中必须有E6、E7基因的持续表达,故E6、E7已成为HPV治疗性疫苗研究焦点。另外，由于HPV基因组已整合于基底层细胞染色体中，病毒复制需要E1、E2的表达，因此国际上有用E1、E2来设计治疗性疫苗的研究报道。??? 1.2.1 HPV治疗性蛋白疫苗：该疫苗的抗原部分一般采用E6或（和）E7，E7免疫原性优于E6，E6/E7融合后可提高免疫效果，在使用或不使用佐剂的情况下均可产生细胞免疫反应。由于E6、E7蛋白本身的免疫原性较弱以及具有潜在的致癌性，而且野生型的E6、E7不易被降解，不利于抗原的递呈，因此HPVE6、E7疫苗多经修改或融合其它蛋白以提高其免疫效果。蛋白质疫苗又分为多肽疫苗，融合蛋白疫苗，嵌合疫苗等。??? 多肽疫苗：E6、E7与人HLA型相配的多肽片段，使用佐剂诱导机体产生CTL反应来治疗HPV感染。如E7肽段疫苗。??? 嵌合蛋白疫苗：HPV晚期蛋白L1和L2的末端与早期蛋白相融合，以激发对早期蛋白的免疫。如L1-E7、L2E7 (TA-GW)、L2E7E6 (TA-CIN)等。??? 融合蛋白疫苗：由HPV早期蛋白相互融合或早期蛋白融合有其它蛋白，能更好的激发对机体免疫系统的免疫功能。如E6/E7、HSP/E7融合蛋白等。??? 1.2.2 HPV治疗性基因疫苗：基因疫苗可分为DNA和RNA两种。采用基因载体携带E6或E7基因进入抗原呈递细胞，并持续表达抗原蛋白分子，免疫系统识别抗原后被激活清除感染HPV的细胞。??? 基因疫苗可持续表达抗原，并易于构建和改造，易于制成多价疫苗，不需要佐剂，热稳定性好，成本低廉等，但同时存在免疫效果弱和重组复活等安全性问题。 ???? 1.2.2.1 DNA疫苗：采用病毒载体或其他载体携带HPV早期基因，如重组有E7的牛痘病毒疫苗、腺病毒疫苗、腺相关病毒疫苗，一些疫苗还混合有APC的表面受体的相应配体、化学激活剂等，还有学者将DNA疫苗中融合有可引导抗原至细胞内降解的序列、致细胞死亡的序列等。DNA疫苗的主要问题为HPV基因整合后具有潜在危险，而且不具有内在的扩增能力，以及不能在体内扩散而影响其效用的发挥。???? 1.2.2.2 RNA疫苗：具有RNA复制子可自我复制[3]。采用α病毒SINrep5作为复制子，融合有早期基因片段和其他基因片段，如单纯疱疹病毒外壳蛋白基因（VP22）、结核杆菌热休克蛋白基因（HSP70）和定位到内体、溶酶体的信号蛋白基因（LAMP-1）。RNA疫苗常采用肌肉注射，疫苗RNA可在肌肉细胞中大量复制导致细胞裂解，