夜叉藤多糖的提取及含量测定.docVIP

分光光度法测定夜交藤中多糖 李金花1，农石生2，黄锁义3* 右江民族医学院 检验学院，百色 533000；2.右江民族医学院 临床全科医学方向，百色 533000；3.右江民族医学院 药学系，百色 533000） DETERMINATION OF POLYSACCHARIRDS IN POLYGONUM MULTIFLORUM THUNB BY SPECTROPHOTOMETRY LI Jin-hua1,NONG Shi-sheng2,HUANG Suo-yi3* （1.Labortory and Clinical of Medicine Sciences，Youjiang Medical College for NationalitiesBaise 533000，China；2. General direction of clinical medicine，Youjiang Medical College for Nationalities, Baise 533000,China；3. Department of Pharmacy, Youjiang Medical College For Nationalities, Baise 533000,China） ，，[1,2]。夜交藤为蓼科植物何首乌的干燥藤茎，性微温，味苦、甜，具有养心安神、祛风湿等功能，用于治疗神经衰弱、失眠、多梦、全身酸痛、贫血等症[3]。夜交藤红色素稳定性，-苯酚法[5]对其多糖含量进行了较详细的研究，1 试验部分 1.1 仪器与试剂5200DB型数控超声波清洗器；722型光栅分光光度计；TG3288电子天平；SHB-III循环水式多用真空泵；HHsyzl-Ni6-C电热恒温水浴锅。 所用试剂均为分析纯。 葡萄糖对照品溶液：0.1 mg/mL葡萄糖对照品溶液，用时用蒸馏水稀释至所需浓度。 5.0%的苯酚溶液:用20 mL移液管精确量取12.50 mL苯酚，置于250 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至250 mL刻度，摇匀，得5.0%的苯酚溶液。 1.2 试验方法 __________________ 收稿日期： 基金项目：右江民族医学院2010-2012年度普高学生科研项目（右医科字〔2010〕9号）。 第一作者简介：李金花(1986-)，女，壮族，广西大新人，临床医学检验技师，主要从事临床医学检验和科研工作。 * 联系人 将新鲜夜交藤干燥、粉碎、过筛（400目），称取粉碎的夜交藤粉末9.0000 g，放入圆底烧瓶中，以蒸馏水为溶剂，加入蒸馏水30 mL，置于数控超声波清洗器中，水浴温度为65 ℃，超声功率为80 W，超声波提取3 h，抽滤。滤渣再加相应溶剂，超声波提取3 h，抽滤，重 复2次，合并3次滤液，用电热恒温水浴锅加热浓缩至10~20 mL，冷却至室温20 ℃后，加入乙醇60 mL，在背光处静置24 h，用砂布漏斗抽滤，滤饼依次用乙醇和乙醚洗两次，烘干 得到灰色粉末状粗多糖固体0.2938 g。 1.2.2 夜交藤多糖的水提醇析提取 称取粉碎的夜交藤粉末9.0000 g，放入烧杯中，加入蒸馏水30 mL，将其置于电热恒温水浴锅中，温度控制在65 ℃，回流3 h，用循环水式多用真空泵进行抽滤，将滤液放入另外的500 mL大烧杯中；用同样的方法重复提取2次；合并3次滤液，用电热恒温水浴锅加热浓缩至10~20 mL，冷却至室温20 ℃后，加入乙醇60 mL，在背光处静置24 h，用砂布漏斗抽滤，滤饼依次用乙醇和乙醚洗两次，烘干得到灰色粉末状粗多糖固体0.5900 g。 1.2.3　夜交藤多糖含量测定 精确称取夜交藤粗多糖0.01020 g置于50 mL烧杯中，加1 mol·L-1H2SO42 mL，加热水解2 h，冷却至室温，稀释至100 mL容量瓶。按照绘制标准曲线的方法，分别精密量取1.0 mL样品液5份，分别置于50 mL的小烧杯中，加5.0%苯酚溶液1.5 mL，再加浓硫酸7.5 mL，混合均匀后放置20 min，用可见分光光度计在波长484 nm处测其吸光度值，由回归方程计算夜交藤中多糖的含量。 2 结果与讨论 2.1超声波和水提醇析提取方法的对比 按照超声波提取法和水提醇析提取法分别对夜交藤多糖进行提取，对两种不同的提取方法所得结果用SPSS 13.0软件处理，结果表明，水提醇析提取夜交藤多糖含量的平均值为0.5900 g，标准差为0.0007416，相对标准偏差为0.03317%；而超声波提取夜交藤多糖含量的平均值为0.2938 g，标准差为0.0002864，相对标准偏差为0.01281%；t=823.358，P0.05，说明这两种方法具有显著性差异，水提醇析法比超声波法提取夜交藤多糖的含量多，但是超声波法所测得的数值结