实验五、活性磷酸盐的测定.pptVIP

磷 过硫酸钾消解法 * * 水中的磷化合物，包括有机态磷和不同形式的磷酸盐。磷是生物生长过程中所必需的元素，常常成为湖泊初级生产力的限制因子。因而，在湖泊富营养化的研究中，磷是最重要的分析项目之一。 总磷、总溶解磷和溶解性磷酸盐的测定，都是将水样作适当处理后，将欲测形式的磷转变成可溶性正磷酸盐，然后用比色法测定。测定各种形式磷时的预处理过程如下。 总磷可以用过硫酸钾消解后单独测定；也可以用过硫酸钾消解后，分别测定总氮和总磷。 1、 原理 水中的含磷化合物，在过硫酸钾的作用下，转变为正磷酸盐。正磷酸盐在酸性介质中，可同钼酸铵和酒石酸锑钾反应，生成磷钼酸；磷钼酸能被抗坏血酸还原，生成深色的磷钼蓝；在700nm波长下，测定样品的吸光度。从用同样方法处理的标准曲线上，查出水样含磷量，计算总磷浓度，用Pmg／L表示。本法最低检出浓度为0.0lP mg／L。 2、 仪器 (1)分光光度计。 (2)消解瓶和高压釜【医用手提式蒸气灭菌器或家用压力锅(压力为1.1～1.4kg／cm2)，锅内温度相当于120～124℃。】 3、 试剂 (1)过硫酸钾溶液：称取4g过硫酸钾(K2S2O8)溶于水中，加水到100ml。 (2)24N硫酸：在l份水中加入2份浓硫酸(体积比)，混匀配成。 (3)钼酸铵-酒石酸锑钾溶液：称取钼酸铵6g和酒石酸锑钾0.24g溶于300ml水中，加入120m124N硫酸,摇匀。然后加水到500ml，再次进行混合后，装入聚乙烯内保存。 (4)抗坏血酸溶液：称取抗坏血酸7.2g，溶于l00ml水中。该溶液在4℃下可以稳定深存一周。 (5)钼-锑-抗溶液：将上述钼铵酸一酒石酸锑钾溶液和抗坏血酸溶液按5：1的比例(体积比)混合摇匀。此溶液可稳定4小时左右，最好使用前配制。 (6)磷标准贮备溶液：称取在l l O℃下干燥3 h后的磷酸二氧钾(KH2PO4)0.2197g，溶于适量的蒸馏水中，移至1000ml容量瓶,加水至标线， 在低温暗处保存。此溶液含磷量为50.0ug／ml。 (7)磷标准溶液：吸取20.00ml磷标准贮备溶液，放于200ml容量瓶中，加水到标线。此溶液含磷量为5.0 ug /ml。 4、 步骤 (1)? 样品预处理：①取适量水样(含磷量不超过0.06mg)，装入消解瓶中，加水到50ml后密封。②加入过硫酸钾溶液10m1。摇匀并密封。③将消解瓶放入高压釜内，于120℃和1kg／cm2的压力下，加热消解30min。消解后放冷，取出消解瓶。静置澄清准备测定。 (1)? 标曲线的绘制： ①分别吸取磷标液0.00,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,10.00,15.00,20.00ml,放于100ml容量瓶中，加水至标线。 ②分别取上述各溶液50.00ml,装入消解瓶后密封。各瓶溶液含磷量分别为0、2.5、7.5、10.0、12.5、37.5和50.0 ug。然后按步骤(1)中的②和③的处理方法，行消解处理。 ③移取处理后样品的上清液25ml于试管内，入2ml钼锑抗溶液，摇匀。将试管在25℃一40℃温度下放置l 5min，进行显色。然后，用光程为l cm或5 cm的吸收池，在700nm处测定吸光度，以试剂空白作参比。④绘制含磷量和吸光度关系的标准曲线。