进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的HPLC检测方案.docVIP

进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的HPLC检测方案 “瘦肉精”是肾上腺类神经兴奋剂，属β－兴奋剂类激素，是指能够促进瘦肉生长的药物添加剂。目前，被称为“瘦肉精”的药物添加剂主要有莱克多巴胺、盐酸克仑特罗、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、硫酸特布他林、西巴特罗、盐酸多巴胺等。早在2002年，我国农业部、卫生部、国家食品药品监督管理局就发布公告，明令禁止在饲料和动物饮用水中添加盐酸克仑特罗和莱克多巴胺等7种“瘦肉精”。 但一些饲料加工企业及养猪饲养业主为谋取暴利，仍在饲料中添加 “瘦肉精”，前后只需10～20d的时间，就可把一头普通猪催变成瘦肉型猪。如2012年4月18日又有一则题为“利欲熏心饲料中添加瘦肉精 事情败露获刑三年”的报道。　　赛智科技应用检测部参考出入境检验检疫行业标准（SN 1116-2002-T），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪经实践检测可提供进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，仅供广大用户参考。以下是进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的测定的详细检测方法。 1仪器与试剂1.1 仪器　LC-10Tvp高效液相色谱仪　Vertex 色谱柱　150mm×4.6mm×5μm　超声波水浴　Sep-Pak 真空抽滤装置，带真空泵　离心机：4000r/min　混匀器　PH计1.2 试剂 甲醇，色谱级。 乙腈，HPLC级。　正己烷。　85%磷酸。　盐酸溶液。　氢氧化钠溶液。　乙酸乙酯+正丁醇溶液（6+4），用水饱和。　磷酸二氢钾。　氨化甲醇。　阳离子交换小柱：SUPELCLEAN LC-SCX Sep-Pak小柱。　盐酸克伦特罗标准品：纯度≥99%。　沙丁胺醇标准品：纯度≥99%。 2 试样溶液的制备2.1 提取 准确称取试样于离心管中，加入盐酸-甲醇溶液，于混匀器上混匀后，置超声波水浴中超声，经超声提取后冷却至室温，离心，将上清液过滤到容量瓶中，残渣用盐酸-甲醇溶液混匀提取两次，合并提取液，用盐酸-甲醇溶液洗涤滤纸并定容至刻度。2.2 净化定量取提取液于离心管中，加入正己烷，于混匀器上混匀，离心后，用尖嘴吸管将正己烷相去掉，共处理二次。再用 NaOH溶液调节PH值，用乙酸乙酯-正丁醇溶液提取样液，每次混匀2min，离心后，用尖嘴吸管将上层有机相合并到另一离心管中，在（70±5）℃下，用氮气流吹至近干，用盐酸-甲醇溶液溶解残渣。将两根SCX小柱串联好安装在真空抽滤装置上，依次用甲醇、水和L盐酸溶液处理小柱；然后将样品提取液加到小柱上；再用盐酸-甲醇溶液洗涤试管并一起转移至小柱中；依次用水、甲醇淋洗小柱。在溶剂流过固相萃取柱后，保持真空抽气状态至少保持5min。于真空装置下放好刻度收集管，用氨化甲醇溶液洗脱，并收集洗脱液。将洗脱液于下，用氮气流吹至近干，用甲醇溶解残渣并定容，过滤膜后，供液相色谱测定。 3 色谱条件色谱柱：Vertex 色谱柱　250mm×4.6mm×5μm； 流动相：乙腈+磷酸二氢钾溶液 流速：1.0mL/min; 温度：30℃； 检测波长：215nm； 进样量：20μL。 4 标准品色谱图