NY_T 1331-2007 乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定.docVIP

中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1331－2007 乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及 嗜热需氧芽孢数的测定Enumeration of Colony of Psychrotrophic Microorganisms，Total Aerobic Bacterial Sporesand Thermophilic Aerobic Bacterial Sporesin Milk and Dairy Products (IS06730:1992 Milk-Enumeration of colony-forming units of psychrotrophic micro-organisms - colony - count technique at 6.5℃；NEN6813：1999 Milk and milk productsDetermination of the content of spores of mesophilic aerobic sporeforming baeteria；NEN6809：1999 Milk and milk productsDetermination of the co - ntent of thermophilic aerobic sporeforming bacteria，NEQ) 2007-04-17 发布 2007-07-01 实施  前 言 本标准的起草参考了IS06730：1992《乳一嗜冷微生物菌落计数一6.5菌落计数技术》(英文版)；荷兰国家标准NEN6813：1999((-孚L与乳制品一嗜中温需氧芽孢数的测定》(荷兰文版)；荷兰国家标准NEN6809：1999《乳与乳制品一嗜热需氧芽孢数的测定》(荷兰文版)。本标准与IS06730：1992、NEN6813：1999、NEN6809：1999的一致性程度为非等效。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口。 本标准 本标准主要起草人：李奇英、马文宏、张华乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定 第一部分：乳中嗜冷菌数测定 1 范围 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。 GB／T4789.1食品卫生微生物学检验总则 GB／T4789.28—2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3 术语和定义 下列术语和定义适用于本部分。3.1 嗜冷菌psyehrotrophiemicroorganisms 指在6.5℃条件下，需氧培养10d，在MPC琼脂平板上形成可计数菌落的细菌、酵母和霉菌。3.2 MPC琼脂milkplatecountagar 乳平板计数琼脂。4 原理 检样在MPC琼脂内，于6.5℃条件下培养10d，菌落计数，算出每毫升检样中的嗜冷菌数。5 稀释液和培养基 5.1蛋白胨一盐溶液5.1.1 成分 酶水解酪蛋白胨1.0g 氯化钠8.5g 蒸馏水1000mL 5.1.2 制法 将酶水解酪蛋白胨和氯化钠溶解于蒸馏水中，用质量分数15％氢氧化钠溶液校正pH至7.0±0.1。分装试管和烧瓶，每管9mL、每瓶90mL或225mL，相对误差不超过±2％。密封后，121℃±1℃高压灭菌15min。5.2 磷酸盐缓冲液：按GB／T4789.28—2003中3.22规定进行制备。5.3 MPC琼脂培养基5.3.1成分 胰蛋白胨5.0g 酵母浸膏2.5g 葡萄糖1.0g 脱脂奶粉1.0g 琼脂10g～15g 蒸馏水1000mL 注1：脱脂奶粉不应含有抗生素类物质。 注2：琼脂用量根据其凝固程度决定。5.3.2 制法 将5.3.1中除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水中，用质量分数15％氢氧化钠溶液校正pH至7.0±0.1。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。必要时使用两层纱布之间夹脱脂棉过滤，分装烧瓶。密封后121℃±1℃高压灭菌15min。若立即使用此培养基，在水浴(6.3)中将其冷却到450(；；否则，将灭菌后的培养基放于暗处温度为0℃～5℃之问贮存，时间不超过30d。为了避免延误倾注培养基的时间，微生物检测之前，加热融化培养基。然后，于水浴(6.3)中冷却到45℃。6 设备和材料6.1 微生物实验室常用设备和材料。6.2 生化培养箱：6.5±0.5℃。6.3 水浴锅：45±1℃。6.4 无菌培养皿：直