吸附铅、镉固定化细菌胞壁多糖小球包埋条件的优化选择.docVIP

吸附铅、镉固定化细菌胞壁多糖小球包埋条件的优化选择 康春莉，高红杰，郭 平*，叶春翔，万婷婷 吉林大学环境与资源学院环境科学系长春 130012 细菌已广泛应用于重金属废水的处理，多糖则是细胞壁的主要成分并通过螯合作用吸附重金属而固定化技术具有处理效率高，生产成本低等优势采用正交实验法，以聚乙烯醇和海藻酸钠为包埋剂，同时添加活性炭，硅藻土等对细菌胞壁多糖进行固定化，并以吸附铅、镉能力为主要考察指标，同时从机械强度、传质性、耐酸性等方面综合考虑，选择最优化的固定化小球最佳配方。结果表明，在聚乙烯醇、海藻酸钠、活性炭、硅藻土、多糖、二氧化硅和饱和硼酸中氯化钙的质量分数分别为10%、0.2%、1.5%、1.5%、0.8%、4%、3%，胶联时间为16 h，己二胺浓度为0.06 mol?L-1的条件下制得的固定化小球对铅、镉吸附的能力较强，并按照最佳配方进行了验证实验，对铅的吸附量达到4.4575 μmol?g-1，对镉的吸附量达到4.1708 μmol?g-1，机械强度、传质性和耐酸性都较好。 细菌胞壁多糖；固定化；包埋；吸附；铅；镉中图分类号：X 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2007）0-0825-05起始于1959年的固定化微生物是一种比一般生物吸附法更为高效的方法，它是利用化学或物理的手段将游离细胞定位于限定的空间区域,并使其保持活性,反复利用的一种新型生物技术。由于该技术在实际应用中可以使工艺自动化、连续化,提高处理效率，降低生产成本, 固液分离简单等优势，20世纪70年代后迅速成为生物、环境等领域的一个研究热点[1-4]。目前，国内外关于固定化微生物技术还没有一个统一的分类标准,主要有吸附固定化、共价结合固定化、交联固定化、包埋固定化和自身固定化等几种方法，而在实际应用中常常是上述二种或几种方法结合起来使用。微生物固定化的载体应具有对微生物无毒、抗微生物分解、机械强度高、传质性能好、载体能再生并重复利用、制备工艺简单、价格便宜等一系列优点。 许多微生物，包括细菌、真菌和藻类都能吸附外部环境中的多种阳离子，目前细菌已广泛应用于重金属废水的处理[5-8]。细菌原生质膜外有明显的细胞壁,与外界环境接触，它既可以避免微生物体受到外界环境的伤害又可以控制原生质和周围环境之间的物质交换。细胞通过螯合吸附金属已经证明和细胞壁结构有关, 现已发现细胞壁是与金属接触最早的部分同时也证明大多数金属都是螯合在细胞壁上[9-14]。而生物体细胞壁的主要成分是胞壁多糖，其对重金属的吸附是胞壁多糖上的一些具有络合、配位功能的基团起作用[15]。这些基团通过与所吸附的金属离子形成离子或共价键来达到吸附金属离子的目的[16]。 影响固定化细胞制备的因素很多,主要有包埋剂、包泥量、吸附剂、交联剂、交联时间及小球粒径等。由于固定化细胞应用于废水处理中,需一定的强度及传质性能,因此本试验同时考察包埋剂中其他添加剂、交联剂对固定化细菌胞壁多糖成球难易以及强度、传质性能的影响,获得固定化细菌胞壁多糖制备的基本技术参数,然后以固定化细菌胞壁多糖吸附重金属的能力为主要指标,强度为辅助指标,采用正交试验确定其适宜的包埋条件。 通过对吉林市污水处理厂的活性污泥中的细菌进行耐重金属性筛选试验，获得对铅离子和镉离子具有较强耐受性的优势菌种。将其分离、纯化、扩大培养后，制备胞壁多糖。 固体培养基每1000 mL蒸馏水中含牛肉膏5克，蛋白胨10克，氯化钠5克，琼脂10克，液体培养基不包含琼脂，其它成分和固体培养基相同。调pH值7.4-7.6，121-125 ℃，高压灭菌20 min。 聚乙烯醇，海藻酸钠，活性炭，硅藻土，二氧化硅，碳酸钠，氯化钙，硼酸，己二胺，戊二醛。 手提式高压蒸汽灭菌锅（上海医用仪器厂）；HZQ-F160型全温振荡培养箱(哈尔滨市东连电子技术开发有限公司)；PHS-3型精密pH计(上海雷磁仪器厂)；WYX-9004型原子吸收分光光度计(沈阳仪通仪器有限公司)。 将载体材料用恒温水浴锅在90 ℃左右完全溶解后，冷却到40 ℃左右，再将其与吸附剂和胞壁多糖按一定比例混合，然后用1.5 mm直径针头的注射器加压将混合液注射到交联剂溶液中成球，然后再与己二胺和戊二醛交联一定时间，最后得到固定化细菌胞壁多糖小球（图1），浸泡在二次水中备用。 图1 固定化流程图 Fig. 1 Immobilization operation process 1.2.2 固定化细菌胞壁多糖小球性能的测试 直径的测量：采用游标卡尺测量直径。机械强度的测试：用手捏包埋好的固定化小球定性描述小球的强度。传质性能的测定：取数粒固定化小球投入盛有50 mL（50 mL水中加0.1 mL红墨水）自制红墨水中放置30 min观察红墨水进入各种粒径小