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实验 植物激素的提取和纯化 一般激素在植物中的含量极低，性质又不稳定，加之细胞中其他化合物的干扰，故测定的方法必须十分灵敏和专一。通常首先用合适的有机溶剂来提取，既要避免许多干扰物质，又要防止破坏激素本身。其次采用各种过柱、萃取或层析步骤，使激素得到部分提纯。然后再用生物的、物理的或化学的方法测定其含量。 植物激素测定的方法 1、生物测定法 生物测定法是通过测定激素作用于植株或离体器官后所产生的生理生化效应的强度，从而推算植物激素含量的方法。 特点：简单易操作，但是其灵敏度及专一性均不够高 。 2、物理和化学方法 薄层层析、气相色谱 GC 、高效液相层析 HPLC 和质谱分析 MS 、色质联谱 GC-MS 可以更为精确地检测多种激素 。 特点：灵敏度和选择性高，重复性好，但对前处理要求较高 。 3、免疫分析法 放射免疫检测法 RIA 和酶联免疫吸附检测法 ELISA 是当前常用的两种激素定量技术。 特点：高专一性，高灵敏性，操作简便，样品往往只需初步纯化。 实验材料、试剂和仪器 1、实验材料：新鲜采集的叶片或其他部分； 2、试剂：80%甲醇； 3、仪器：研钵、移液枪、塑料离心管、高速低温离心机、Sep-Pak C18柱、吹氮气装置。 实验步骤 1、植物激素的提取： 2、激素的纯化：过C18柱法 3、取出300μl于玻璃试管中，氮气吹干备用。 * 分次加入3ml 80%甲醇 研磨 称样（0.5g） 倒入塑料离心管 10000g 10min 离心 倒出上清液 5ml针筒接在C18柱上 5ml 100%甲醇 5ml 70%甲醇 5ml乙醚 加样 *
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