板栗胚珠培养研究初报.pdfVIP

维普资讯 第29卷 第 5期 北 京 林 业 大 学 学 报 V01．29．No．5 2007年 9月 JOURNALOFBEIJING FORESTRY UNIVERSITY Sep．，2007 板 栗 胚 珠 培 养 研 究 初 报 张 玲 尹伟伦 王华芳 (北京林业大学生物科学与技术学院) 摘要 ：以板栗胚珠为外植体 ，筛选 了板栗胚珠培养适宜的外植体采摘时期、生长调节剂组合、培养基中碳源种类、培 养基中糖浓度等指标 ，并深入探讨了板栗胚珠培养中存在的急需解决的技术问题，为板栗体细胞胚胎高频发生体 系的建立奠定了基础 ．结果表 明：①在板栗胚珠离体培养 中，适宜的外植体采摘时间为板栗第 1次盛花期后 的30 ～ 44d；②单独使用 0．5或 1．0mg／L的2，4-D、6-BA、TDZ均不能诱导板栗胚珠的体细胞胚胎发生 ；③不 同种类 的细 胞分裂素与2，4-D配合使用时，其种类和浓度直接影响出胚率 ，6-BA与 2，4-D配合使用的效果 明显优于 KT、TDZ、 rZT分别与 2，4-D的组合 ，6．0mg／L的2，4-D和0．5mg／L的6-BA配合使用 ，有利于诱导胚珠的体细胞胚胎发生 ；④ 板栗胚珠培养中，胚性愈伤组织的发生与 2，4-D浓度 、细胞分裂素种类、细胞分裂素浓度都显著相关 ，4．0mg／L的 2，4-D和 1．0mg／L的TDZ配合使用 ，利于诱导胚性愈伤组织的发生 ；⑤使用白砂糖作为培养基中的碳源最好 ，其效 果 明显优于蔗糖、葡萄糖、麦芽糖 ；⑥培养基 中自砂糖浓度为 10～40g／L时，都能诱导板栗胚珠的体细胞胚胎发生 ， 但外植体死亡率呈现 出随糖浓度增加而升高的趋势． 关键词 ：板栗 ，胚珠 ，胚性愈伤组织，体细胞胚胎发生 中图分类号 ：$664．2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000-1522(2007)05-0099-07 ZHANGLing；YINWei—lun；WANGHua-fang．OvulecultureinvitroofCastaneamollissimaBI．Journal ofBeingForestryUniversity (2007)29(5)99—105 [Ch，16ref．]CollegeofBiologicalSciencesand Biotechnology，BeijingForestryUniversity，100083，P．R．China． TheovulesofCastaneamoUissima B1．wereusedasexplantsinthisexperimenttotestthemainactive factorswhencultured invitro．Thesefactorsincludedhormonecombinations，thecollectingdatetogetovules aswellas thetypesandconcentrationsofcarbohydratesourceinthebasicmedium．111erushtechniquesused toovercomethedifficultiesexisting in OVUleculture invitro ofC ．moUissima werealsodiscussed inthis paper．Resultsoftheexperimentindicatedthat：1)Theoptimal periodtocollectthebarsforgettingfitting ovuleswas about30to44 daysafterthefirstfu