毛葡萄芪合成酶基因的克隆及序列分析.pdfVIP

维普资讯 西北植物学报 ，2007，27(8)：1544—1549 ActaBot．Borea1．-Occident．Sin． 文章编号 ：1000—4025(2007)08～1544-06 毛葡萄芪合成酶基因的克隆及序列分析 王西平，刘 斌，王跃进 (西北农林科技大学 园艺学 院，农业部西北 园艺植物种质资源与遗传改 良重点开放实验室，陕西杨 陵 712100) 摘 要 ：芪合成酶是 白藜芦醇生物合成过程 中起关键作用 的酶 。通过 RT-PCR，从高抗葡萄黑痘病 的中国野葡萄 毛葡萄 商‘一24’克隆了芪合成酶基 因家族 的2个成员VqSTS1和 VqSTS2，其 eDNA全长均为 1179bp，编码 392个 氨基酸 。氨基酸序列分析表明，VqSTS1和 VqSTS2编码氨基酸 247～257位点的 “IPN(S／F)AGAIAGN”是芪合 成酶家族固有 的氨基酸保守结构域 ，368～378位点的 “GVLFGFGPGLT”是芪合成酶与查尔酮合成酶家族 固有 的 保守序列特征。在编码的392个氨基酸中，VqSTS1和 VqSTS2仅有 12个氨基酸不同，氨基酸一致性达 97 。多 重 比较分析显示 ，VqSTS1与 VqSTS2与五针松、河岸葡萄、白粉藤、华东葡萄及欧洲葡萄等 STS在氨基酸水平 的 一 致性分别为 65 、96 、97 和 98 。将 VqSTS1和 VqSTS2登 录 GenBank，登 录号分别为 EF158856和 EF158857。 关键词 ：毛葡萄 芪合成酶 ；基因克隆；序列分析 中图分类号 ：Q789 文献标识码 ：A GeneCloningandSequenceAnalysisofStiibeneSynthasefrom ChineseW ildVitisheyneana Roem． Schuit WANGXi～ping，LIU Bin，WANGYue—jin (CollegeofHorticulture，NorthwestA ＆ FUniversity，Yangling，Shaanxi712100，China；KeyLaboratoryofNorthwestHorticul turePlantGermplasm andGeneticImprovementofAgricultureMinistry，Yangling，Shaanxi712100，China) Abstract：Theproductionofresveratrolisregulatedby thekeyenzymestilbenesynthase，which converts onemoleculeofP—coumaroyl—CoA and threemoleculesofmalonyl—CoA into 3，5，4r_trihydroxystilbene， commonlyknownasresveratro1．Twoof1179bp cDNA fragmentsofstilbenesynthase (S了1S)genes， 5715land STS2，wereisolatedbyreversetranscription-polymerasechainreaction (Rrr_PCR)from ChinesewildⅥtisheyneanaRoem． Schultclone ‘Shang一24’thatarehighlyresistanttoanthracnose． Thesetwo cDNA sequenceshavethecompleteopen reading frameand encode392 amino acidresidues whichhaveacalculatedmolecularmassof42．889kD and42．757kD，respectively．Thededucedaminoacid sequencesofVqSTS1andVqSTS2shared97 id