加压下采用自主研发保存液及不同保存方法对半月板保存的研究.pdfVIP

第 12卷 第 1期 2012年 1月 科 学 技 术 与 工 程 Vo1．12 No．1 Jan．2012 1671—1815(2012)叭一0025-05 ScienceTechnologyandEn~neefing @ 2012 Sci．Tech．Engrg． 生物科学 加压下采用 自主研发保存液及不同保存方法 对半月板保存的研究 刘 军 王 臻 果向东 靳忠民 连 芩 (第四军医大学西京医院骨科五病区，西安 710032) 摘 要 为探讨加压环境下采用不同保存方式及 自主研发半月板保存液对半月板保存的最佳方法，用成年山羊20只，共提供 40只半月板，将其随机分为4小组分组保存 (A组：① 自主研发保存液组(国家发明专利号为：201110188468．4)，② uV保存 液组，③ -MEM保存液组；B组：梯度降温加一80℃低温冰箱保存)，定期取部分半月板组织进行组织学、组织化学、细胞存活 率及免疫组织化学检测。A组的自主研发保存液组和B组经过冷冻保存 1、3、6、9周后，胶原纤维排列规则、紧密，纤维粗细均 匀，横纹清晰。半月板纤维软骨细胞形态基本正常，半月板纤维软骨细胞基质黏多糖含量丰富，细胞存活率较高；A组中uV 保存液组、oL—MEM保存液组组经过保存后细胞大多出现基质中黏多糖含量降低，细胞器结构不清，细胞存活率低。在所有保 存组中，自主研发保存液组半月板保存效果更好。说明自主研发保存液组有利于保持半月板中纤维软骨细胞的活性，对半月 板损伤更小。在半月板纤维软骨细胞存活率方面，自主研发保存液组和uV保存液组、0一【MEM保存液组的差别有统计学意义 (P0．05)，自主研发保存液组和 一80aC低温保存对维持半月板纤维软骨细胞活性无明显 区别，但保存更方便，保护作用 更强。 关键词 保存方法 半月板 加压 免疫组织化学 中图法分类号 R684； 文献标志码 A 半月板大部切除或全切除后，关节半月板承受 度降温保存方法对羊半月板进行保存并进行多指 的应力显著增加，半月板损伤风险加大。1948年， 标的衡量和测试，找到一种最佳的保存方法，使半 Fairbanks等提出半月板切除后可导致骨关节炎 ¨j， 月板的生物活性维持时间达到9周，为临床半月板 此后多个研究表明，半月板切除或部分切除术后， 移植患者治疗提供高质量的同种异体移植材料。 最早 28个月，晚至 1O年，70％ 以上的患膝发展为 1 资料与方法 半月板损伤、骨关节炎 J。但Pasa等 研究表明， 半月板全切后关节承受的压力将明显提高，易造成 1．1 材料与分组 半月板损伤及微骨折。目前临床可行的半月板重 成年山羊20只，雌雄不限，体重 (3O～40)kg。 建措施只有同种异体半月板移植。一些动物实验 共提供40只半月板，将其随机分为4组：作为供体， 表明异体半月板移植后可以成活并起到关节保护 切取半月板后处死。 作用。目前最常用的保存方法主要有低温冷藏、深 1)A组：将保存液和半月板组织放入密封容器 度冷冻等 J，但哪一种方法保存的半月板胶原纤维 中，通过调压阀把压力设置为40kPa，每天加压4h。 保存完整、细胞活性高、生物学特性等维持较好，尚 其中A组又分为 自主研发半月板软骨保存液组 (自 未有动物实验证实。通过 (O-_4)oC下采用 自主研 主研发，国家发明专利号为：201110188468．4)、UV 发半月板保存液、uV保存液、．MEM保存液以及梯 保存液组、仅一MEM保存液组(0℃一4℃)。 2)B组梯度降温组：梯度降温组 (以2oC／min 2011年 10月27目收到 的速率梯度降温后．将半月板组织置人 一78℃ ～ 第一作者简介：刘 军。E—mail：tutuhe@163．corn。 一 80℃冰