Lab-on-Chip技术在药物筛选，研发及生产中的应用.pdfVIP

Gene Express 基因快讯2010年第2期 Lab-on-Chip技术在药物筛选，研发及生产中的应用 一．基于酶促反应的高通量药物筛选及药学相关研究 随着基因组学、化学合成技术及实验室自动化技术 的发展，在制药与生物技术企业以及学术机构从事药物 筛选的科学家们需要面对开发大量新筛选实验的艰巨任 务。这些实验必须是快速、经济、微量、灵敏、准确和 自动化的。传统的药物筛选实验技术，比如亲近闪烁检 测法 （SPA ）、时间分辨荧光共振能量转移检测法 （TR- 图2. Mobility-Shift Assay技术原理 FRET ）、IMAP检测等，往往都是相当复杂的，而且需 Mobility-Shift A ssay 正是利用底物和产物所带电荷的不 要特殊的试剂，比如放射性试剂、特殊的抗体或其它的 同，将二者进行分离，并分别进行检测的。在微流体芯片 检测试剂。另外，酶活性的分析需要精确的测定底物的 中对样品进行分离的力量来源于两个不同的方面，电动 Km和抑制剂的Ki ，这就需要测定酶促反应过程中产物生 力学和液体压力。工作时，96或384孔板中的反应体系在 成的速率。大多数药物筛选技术都局限于终点法检测， 负压的作用下通过芯片底部的吸样针被吸入芯片内部的 因而很难实现对整个酶促反应过程的跟踪与检测。为 管路中。由于芯片中分离管路上被施加了电压，带有荧 了突破传统药物筛选技术的种种局限，美国Caliper Life 光标记的多肽底物和反应产物由于电荷的不同被分离， Sciences公司将其领先的微流体芯片技术 （Microfluidic 然后在检测窗口进行信号的激发和检测。在检测每一个 Lab-on-Chip ）应用于药物筛选领域，开发了不需要抗体 样品时，都可以同时看到底物和产物的信号。图3显示了 和放射性试剂并具有实时动力学检测功能的EZ Reader系 Mobility-Shift Assay技术的典型信号数据。产物的量通过 列药物筛选平台 （图1）。 计算Conversion值，即产物峰的高度比上底物峰和产物峰 高度之和 （Product peak height/ （Substrate ＋Product peak height ）），来进行评估。在进行实时动力学检测时，仪 器会根据设定的时间间隔将样品吸入芯片中进行分析。 Un-reacted Substrate Peaks Data traces from a 4-sipper chip showing varying amounts of Product Peaks substrate conversion to product.