造血干细胞移植及在肿瘤性疾病中的应用.docVIP

《造血干细胞移植及在肿瘤治疗中的应用》讲稿 造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation; HSCT）是经大剂量放、化疗或其他免疫抑制剂预处理，清除受者体内的病理细胞（肿瘤细胞、异常克隆细胞、病态造血细胞）或阻断发病机制，然后把异体或自体的造血干细胞移植到受者体内，以重建受者的正常造血及免疫功能，达到治疗疾病目的的治疗手段。 据国际骨髓移植登记处（International Bone Marrow Transplantation Registry; IBMTR），欧洲血液及骨髓移植组（European Group for Blood and Marrow Transplantation, EBMT）等组织统计，1990年以来，自体造血干细胞移植的数量逐渐增多，超过了异基因造血干细胞移植数量，尤以恶性淋巴瘤和乳腺癌的移植数量为多。自1993年以来，自体外周血干细胞移植（autologous peripheral blood stem cell transplantation; APBSCT）的数量超过了自体骨髓移植（ABMT），1996年以来接受自体干细胞移植的患者中，90%以上为APBSCT。近几年，随着对脐血研究的不断深入，发现人类脐血中含有大量的造血干/祖细胞，其中淋巴细胞抗原性弱，功能相对不成熟，移植后发生急性移植物抗宿主病（GVHD）的危险性低等，已成为造血干细胞移植的又一方法，即脐血干细胞移植（cord blood stem cell transplantation, CBSCT）。目前，许多国家已开展了脐血干细胞移植，并建立了脐血库。相信随着造血干细胞移植技术的不断完善和发展，必将有越来越多的患者有机会、有条件接受此项治疗，并从中受益。此项技术的不断发展也必将推动恶性肿瘤治疗在多方面的进步。 【造血干细胞的生物学】 一、造血干细胞的增殖和分化 干细胞（stem cell）系具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞。早期胚胎中的原始生殖细胞具有广泛的发育潜力，称全能干细胞，它一旦分化分多能干细胞，其分化能力就受限于某些器官系统。 造血干细胞（hematopoietic stem cell, HSC）是各种白细胞和免疫细胞的始祖，担负极其重要的生理功能。具有三个重要特征：①高度自我更新或自我复制的能力；②多向分化潜能；③绝大多数可长期维持在非增殖状态，这些特征随着干细胞的分化逐渐减弱和消逝。所谓干细胞的自我更新即细胞通过有丝分裂产生的两个子代细胞仍具有分裂前的增殖和发育潜能。所谓多向分化，即它们具有相同的向多种细胞发育的潜能，只是由于单个干细胞所处的微环境不同，受控于不同的调节系统才发育成不同的后代。造血干细胞的自我更新和多向分化是通过不对称性分化实现的。即造血干细胞在分裂分化过程中，由一个变为二个，其中一个仍然保持着它自己的一切生物学特性从而维持体内干细胞数量不变，而另一个则分化为早期的造血祖细胞进入增殖池，后者在骨髓基质细胞和细胞因子等的调控下进一步增殖分化为各系造血祖细胞，前驱细胞和成熟细胞并释放入血执行生理功能直至衰老死亡。到目前为止，造血干细胞不对称性分化的机制尚不清楚，但造血细胞生长因子的作用具有重要的作用。 二、造血干细胞的特征和识别 造血干细胞没有明确的形态学特征，形态上都表现为淋巴样的单个核母细胞，这就给干细胞从形态的识别和检测带来了困难。但从干细胞的功能及细胞表面抗原的表达上则为造血干细胞的识别和分离提供了条件。 （一）从功能的角度出发，可用细胞培养方法在体内观察细胞发育的潜能，从而形成了一系列检测各种造血祖细胞和干细胞的方法。 1、脾集落形成单位（CFU-S） 形成这种集落的细胞是较早期的造血干细胞，具有形成红细胞、中性粒细胞、嗜酸粒细胞、巨核细胞或混合多种造血细胞的多向分化能力。 2、髓系多向祖细胞集落（CFU-GEMM）是检测可以生成红细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和巨核细胞的祖细胞，它具有一定的自我复制能力，有向不同细胞学分化的能力，具有造血干细胞的部分功能。 3、长期培养起始细胞（LTC-IC），是指那些经5~8周培养后仍能生成单向或多向性祖细胞群的造血细胞，比较接近多能干细胞，这种检测方法是近几年实验和临床研究中国的较多、较可靠的干细胞检测方法。 上述检测和实验的方法都不能直接识别单个干细胞。 （二）细胞表面抗原表达及其单克隆抗体的研究为单个造血干细胞的识别和分离提供了条件：利用白细胞分化抗原（Cluster of differentiation, CD）的单克隆抗体可以比较精确的区分早期祖细胞和已分化为各细胞系的祖细胞。Thy-1、干细胞抗原1（Sca-1）、干细胞因子受体C-Kit、CD34、AC133、HLA-DR、Lin、CD33、C