一种仅用化学物质就可直接重排人体肝癌细胞治疗肝癌的方法.docVIP

一种仅用化学物质就可直接重排人体肝癌细胞治疗肝癌的方法 Hisashi Moriguchi ,a1,2Yue Zhang,3Makoto Mihara,1Chiumi Sato4 1细胞多功能诱导研究和应用部，整形外科系，医学院，东京大学，东京，日本 2麻省综合医院和哈佛医学院，波士顿，美国 接收时间2011-09-14，采用时间2011-12-23 这篇文稿经Creative Commons Attibution 授权-非商业使用-共享许可证3.0。要看许可证副本请访问/licenses/by-nc-sa/3.0 3放射肿瘤系，列女执事医院和哈佛医学院，美国 4健康科学研究系，健康科学研究院，东京医科齿科大学，东京，日本 A邮箱：moriguchi-tky@umin.ac.jp 摘要 多种用于直接重排人体细胞的方法已得到发展，但是，对于肿瘤细胞的重排和消除方法却未出现。在此文中将介绍一种新颖的、仅用化学物质即可重排和消除人体肿瘤细胞的治疗方法。 此种方法可以用于多种可以表达醛酮还原酶系1-B10（AKR1B10）或者类维生素A受体的人体细胞（RXRs） 多种用于直接重排人体细胞的方法已得到发展，但是，对于肿瘤细胞的重排和消除方法却未出现。 在小的（89次）随机可控有效的肝细胞癌治疗试验中发现，非环式维生素A（ACR）被发现可降低复发率，相似的结果在多次数（401次）的试验中依然得以观察到。经过有效治疗2年及以后的危险率（ACR同安慰剂对比）为0.27（95% cl0.07-0.96）。但是在治疗后1-2年内，得不到类似的结果。在一年内，该数据为0.72（95% cl0.45-1.17），这让醛酮还原酶可以抑制维甲酸诱使细胞分化的事先假设得不到证明。 结果 接受肝脏移植后病人肝脏肿瘤细胞AKR1B10的表达情况 通过前面我们以及其他人描述过的方法，我们研究了10位经过肝脏移植后病人的肿瘤细胞内AKR1B10的表达情况，6例观察到表达（见图表1a，1b和补充图表） 图表1 （a）通过蛋白质印迹分析仪检测病人（n=6）肝移植后细胞内AKR1B10表达，其余4个样品为AKR1B10阴性的，β肌动蛋白为对照。 6位表达AKR1B10肝癌患者的体外抗癌药物灵敏性测试 在为6位表达AKR1B10肝癌患者的体外抗癌药物灵敏度测试中，6天后，可以观察到经过ACR和ACR联合zopolrestat（唑泊司他，一种醛糖还原酶抑制剂）共同作用于AKR1B10阳性肝细胞后的存活率差别，单独使用ACR和ACR联合zopolrestat两种方法治疗癌变细胞，6天后同样可以观察到存活率差别。更加重要的是，3天后只用ACR治疗的样品甲胎蛋白平均数值为45.3ng±5.2ng/l*104 cells/24h（P0,.001 曼-惠特尼检验方法），而经ACR联合zopolrestat治疗后升高了3.6ng±2.2104 cells/24h；只用ACR治疗3天后白蛋白的平均值为19.3ng±7.3ng/l*104 cells/24h,,与此同时，经过ACR联合zopolrestat治疗的样品，白蛋白平均数值显著上升了93.3ng±3.0ng/l*104 cells/24h（P-0.02 曼-惠特尼检验方法） 图表2 (A)6天后AKR1B10阳性肿瘤细胞存活率。（B)6天后AKR1B10阴性肿瘤细胞存活率。 AKR1B10阴性肿瘤细胞的四位患者的体外抗癌药物灵敏性检测 用上文同样的检测方法针对于AKR1B10阴性肿瘤细胞的四位病人，6天后，AKR1B10阴性癌细胞生存率呈现明显差异，单独使用zopolrestat和ACR联合zopolrestat两种治疗方法结果也出现了明显差异，单独使用ACR的甲胎蛋白值为50.3ng±6.5ng/l*104 cells/24h而联合治疗后的值改变为7.6ng±3.5ng/l*104 cells/24h（P=0,.001 曼-惠特尼检验方法）；单独用ACR治疗后白蛋白平均值为17.1ng±5.2ng/l*104 cells/24h，而联合治疗后平均数值明显改变为85.3ng±3.9ng/l*104 cells/24h（P=0,.02 曼-惠特尼检验方法） 肝肿瘤细胞内耗氧量 经ACR单独使用、zopolresat单独使用和ACR-zopolrestat联合使用，三天后在AKR1B10阳性肝细胞的氧气需求测量中，经联合治疗后的耗氧量明显大于其他两种，（图表3A，P0.001 曼-惠特尼检验方法）用同样方法测试AKR1B10阴性细胞，经联合治疗后的耗氧量也明显大于其他两种（图表3B，P0.001 曼-惠特尼检验方法） 图表3 （A）单独使用ACR处理AKR1B10阳性肿瘤细胞、单独zopolrestat处理和