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畜牧兽医学报 2007 ,38 (5) :476～481
A ct a Veteri na ri a et Zootech nica S i nica
猪传染性胃肠炎病毒 Ta qMan 荧光定量
RTPCR 检测方法的建立
1 1 1 1 1 1 ,2 1 ,2
白兴华 ,冯 力 ,陈建飞 ,时洪艳 ,孙东波 ,吴波平 ,高秀春
( 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室 ,
哈尔滨 15000 1 ; 2 . 东北农业大学 , 哈尔滨 150030)
摘 要 : 根据猪传染性胃肠炎病毒和猪肌动蛋白的基因序列设计合成了引物和探针 ,通过对荧光定量 R TPCR 反
应条件的优化 ,建立了 TaqMan 荧光定量 R TPCR 检测 T GEV 的方法 。同时对 37 份现地病料进行检测并与常规
μ
R TPCR 方法 、T GEV 抗原快速检测试剂盒比较 。结果 ,该方法的检测敏感性达到 15 . 3 拷贝/ L ,且具有很好的特
3
μ
异性和重复性 ,而常规 R TPCR 方法只能检测到 1. 53 ×10 拷贝/ L 。对 37 份现地病料的检测结果也表明该法
( ) ( ) ( )
检出 17 份 比常规 R TPCR 方法 检出 12 份 和 T GEV 抗原快速检测试剂盒 免疫层析法 ,检出 10 份 的敏感性
高 。
关键词 : 猪传染性胃肠炎病毒 ; TaqMan 探针 ;荧光定量 R TPCR
中图分类号 :S852 . 65 ; S854 . 43 文献标识码 : A 文章编号 :(2007)
Development of Ta qMan Fluorescence Quantitative RTPCR Assay f or
Detection of Transmissible Gastroenteritis Virus of Swine
BA I Xin ghua1 ,F EN G Li1 ,C H EN J ianf ei1 ,SH I Hon gyan1 ,
SU N Don gbo1 ,WU Boping1 ,2 , GA O Xiuchun1 ,2
( 1. D ep a rt m ent of S w i ne I nf ect ious D is eas es , N at ion al Key L aboratory of Veteri na ry
B iotech nol og y , H a rbi n Vete ri na ry R esea rch I ns t i
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