CYP2D6酶活性色谱法测定及其在代谢分型中应用尿中普罗帕酮对映体测定及其立体选择性代谢研究.pdfVIP

CYP2D6酶活性的色谱法测定及其在代谢分型中的应用 尿中普罗帕酮对映体的测定及其立体选择性代谢的研究 浙江大学药学院药物分析专业 98级硕士研究生 马明铭 导师 吴永江副教授 曾苏 教授 摘 要 CYP2D6酶活性的色谱法测定及其在代谢分型中的应用 f DB)及其它30多种药物的代谢，而且发现CYP2D6酶活力强弱在人群中呈 Metaboliser， 多态性分布，即可分为强代谢者(Extensive EMs)和弱代谢哲 床安全、有效地用药，既防止PMs体内有效血药浓度过高而积蓄、又防止EMs 体内有效血药浓度太低而达不到治疗目的，测定人体内CYP2D6氧化酶的活 性是十分重要的。y 药物。本研究建立了高分辨毛细管气相色谱法，测定尿中DM及其代谢物3一 值(Metabolic 康志愿者的CYP2D6代谢分型测定。IMR根据公式计算： L MR=告揣×0．948 进样口温度：260C；氢火焰检测器(FID)，检测器温度：260。C；载气： N2；分流比50：1；燃气：H2，50ml／min；助燃气：空气，500 ml／min；Range=l： 进样量：211l。 加热30分钟，冷却后加入乙醚2ml，振荡，离心，弃去上层乙醚层，尿液中 加入12mol／L la 将提取液分离到另一干净离心管中，吹干后加入25g／ml正二十二烷内标溶 液50ul定容。取2ul进行GC分析。 It ti tl 结果DM在O．10 u g／ml～2．00 g／ml，DT在0．20 g／ml～20．00g／ml范 围内线性关系良好，以浓度对DM或DT与内标峰面积的比值回归，得线性方 程为：DMy=0．8283x一0．0912(r=O．999)，DT la DM和DT检测限分别为8ng和4rig，定量限分别为0．10土0．006 edml和0．20± 98．9％，DT o．009“g／ml：方法平均回收率为DM 95．1％；方法的R内相对标 准偏差分别小于8．67％和5．62％，闩间相对标准偏差分别为3．3％和3．O％。测 定11名健康志愿者服用右美沙芬后，各个时间段尿样中的DM和DT浓度， 得出9名强代谢者和2名弱代谢者在各个时间段的平均尿药浓度及代谢趋势。 研究还进一步对86名健康志愿者进行了CYP2D6酶活性的表型分型，在86 名受试者中，MR值大于0．3的5名受试者被分为弱代谢者，PMs发生毫i缸。舶 ％。该方法简单，准确，是测定CYP2D6酶基因活性的理想方法。’／ ， 尿中普罗帕酮对映体的测定及其立体选择性代谢的研究 外消旋体给药，但S-PPF的毒副作用强于R-PPF。为了研究普罗帕酮对映体在 体内代谢的立体选择性，本实验建立了柱前GITC手性衍生化测定普罗帕酮对 映体的反相高效液相色谱法。 2