寡核苷酸抑制LINGO-1基因表达调控的实验研究.pdfVIP

深圳中西医结合 杂志 2011年 12月 第 21卷第 6期 · 325 · [文章编号] 1007—0893(2011106—0325—04 寡核苷酸抑制LINGO一1基因表达调控的实验研究 卢文浩 余 铮 沈 哲 (1．深圳市第二人民医院骨科，广东 深圳 518035；2．深圳市第二人民医院脊柱外科 ，广东 深圳 518035) [摘 要] 目的：利用人工合成 以LINGO一1基 因的mRNA为靶 目标 的 内切磷硫酰核酸序列 的寡聚脱氧核糖核苷酸 (oligodeoxyribonucleotides，ODN—PSsXT一1)，对脊髓损伤部位进行干预 ，分析LINGO一1表达 的改变。方法：采用 新生 SD大 鼠60只制成脊髓损伤模型后，再随机分为ODN—PSsXT一1实验组 30只和实验对 照组 30只进行干预 实验 ； 在不同的时问段，利用免疫组化染色 ，Westernblot和RT—PCR方法对细胞表达 的LINGO—lmRNA进行分析 。结果：Western blot和 RT—PCR分析结果表 明，XT—lODN—PSs可减少 LINGO一1基 因的表达 。结论 ：人工合成XT一1ODN—PSs寡核苷 酸对脊髓损伤后LINGO一1表达有明显 的抑制作用 ，从而有利于脊髓损伤后的再生 。 [关键词] 寡核苷酸；脊髓损伤；LINGO一1；表达 [中图分类号] R681．53 [文献标识码 ] A RegulationofODN-PSsonLINGO一1mRNA Expression in InjuredSpnialCord LU Wen—hao，YU Zheng2SHEN Zhe2 (1．DepartmentofOsteology,theSecondPeoplesHospitalofShenzhen，GuangdongShenzhen518035； 2．DepartmentofSpineDivision，theSecondPeoplesHospitalofShenzhen，GuangdongShenzhen518035) [Abstract] Objective Toexploretherelationshipbetweenoligodeoxyribonuc1eotide(ODN—PSs)andthe injuredneurousregenerationbyanalyzingtheexpressionofLINGO-1mRNAofastrocyteinvivointerferedby Syntheticphosphor0thioateoligodeoxyribonucleotide(ODN—PSs)． Methods Thespinalcordinjuries(SCI)rat modelswerefoundedby improvedAllenW D，and then randomly divided into experimentalgroup treated with OND-PSsXT-1andnormalcontrolgrouptreatedwithnormalsodium (NS)，with30ratsineachgroup．The mRNA andproteinexpressionsofLINGO一1geneandGFAPgeneininjuredspinalcordwereanalyzedby Immunocytochemicalstain，RT-PCR andwesternblottechniques． Results Theresultsofwestern blotand RT-PCR showedthatODN-—PSscould down--regulatethemRNA andprotein expressionsofLINGO--1geneobviously~ Conclusion ODN—PSscan significantly inhibittheexpressionofLNI GO一1，andbenefittohteneurousregeneration ofinjuredspinlcord． [KeyWords] Oligodeoxyribonucleotide；SpinalCordInjury；LINGO一1：Ex