玉米ae基因分子标记及辅助选择研究.pdfVIP

摘 要 玉米(ZeaL．)是世界上重要的粮食、饲料与工业原料作物。玉米作为 mays 工业原料最主要的成份是淀粉，其中所含的直链淀粉在工业上用途很广。但普通 玉米直链淀粉所占比重很低，限制了玉米中直链淀粉的应用。因此，开展高直链 淀粉玉米育种，对发展高直链淀粉的生产和加工具有重要的意义。由于控制玉米 直链淀粉含量的ae基因为单隐性基因，因此运用分子标记辅助选择的方法对后 代进行快速选择，可以提高育种效率，加快育种进程。本文根据发表在GeneBank 上的玉米淀粉分支酶基因(口e)序列，筛选分子标记，建立ae基因分子标记技 术，并应用于高直链淀粉玉米回交后代的辅助选择，结果表明： 1．根据NCBI上公布的玉米淀粉分支酶基因(口e)序列设计引物，分别以 高直链淀粉玉米ae．1和普通玉米鲁原92基因组为模板，扩增了ae基因的大部 分序列，经测序并通过序列比对分析表明，高直链淀粉玉米和普通玉米在所测序 列部分具有较高的同源性，除在3处有3-4bp连续碱基的缺失外，其余均为SNP 和单碱基的插入／缺失。 2．在上述差异处分别设计引物，经过筛选，选择在基因第9和第10外显子 indel处设计的引物作为标记引物。在含有ae基因的玉米材料中能 之间一个4bp 够扩增出一条496bp的特异性条带，称之为ae496标记。利用该标记对14种高 直链淀粉玉米自交系和24种普通玉米自交系材料进行检测，高直链淀粉玉米自 交系基因组中均能扩增出ae496条带，而普通玉米自交系中则全部扩增不出该条 带。因此该标记可作为ae基因的显性分子标记。 3．用ae496标记对高直链淀粉玉米自交系和普通玉米自交系三个组合的Fl 代、F2代、BClFl代进行检测。结果表明该显性分子标记符合孟德尔遗传规律。 4．通过高直链淀粉自交系与普通玉米自交系杂交组合F2代籽粒直链淀粉含 量和标记的分析，发现直链淀粉含量在32．1％以上的玉米籽粒均能扩增出ae496 条带，而扩增不出ae496条带的玉米籽粒的直链淀粉含量均在25．8％以下。可以 看出ae显性分子标记与籽粒直链淀粉含量之间存在相关性，通过分子标ae496 可辅助选择ae基因获得高直链淀粉性状。 5．通过对BClflF、BC2F1代分子标记辅助选择，分析其自交和回交后代的选 择效果，结果显示通过标记辅助选择其后代可获得ae基因，其回交一代和回交 二代分子标记辅助选择ae基因的效率较非标记选择分别高53．3％和73．3％，表明 利用分子标记在回交后代中选择ae基因可显著提高选择效率。 关键词：玉米，淀粉分支酶，高直链，分子标记，标记辅助选择 Abstract iSthemost MaizeiSoneofthemost intheworld．Inmaize．starch importantcrops elementasindustrialrawmaterial．In hasawide of important starch，amyloserange USeSin hasalow in ofmaize dryweight weight，which industry．Anlyloseproportion restricts of inmaize．Soto maize applicationamylase develophighalTlylosebreeding hasa onthe of and greatsignificancedevelopmentamylaseproductionprocession．As theae whichcontrols contentinmaizeisarecessive