PTEN、VEGF在犬乳腺肿瘤中的表达及药物治疗犬乳腺癌动物模型的研究.pdf

摘要 乳腺肿瘤在母犬最为常见．抑癌基因PTEN及血管内皮生长因子(Ⅵ’GF)在乳腺肿瘤中的 表达人医中研究比较多，而在犬乳腺肿瘤中报道很少。为此，我们采用实时荧光定量PCR和免 疫组织化学两种方法检测了它们在犬乳腺肿瘤组织中的表达情况，以观察其表达水平的高低是否 与恶性肿瘤的转移相关，并原代培养了一犬乳腺癌细胞系(cMTl211)，将纯化好的癌细胞接种裸 鼠建立犬乳腺癌模型，进行了相关试验，具体研究内容如下： 1．对从2005年7月到2006年8月收集的50例犬乳腺肿瘤进行组织病理学分类，通过实时荧光 结果显示：PTENmRNA在正常犬乳腺组织中的相对表达量与良性乳腺肿瘤两者之间差异不显著 (，O．05)。在恶性乳腺肿瘤组织中PTENmRNA表达量与正常犬乳腺组织和良性乳腺肿瘤相比 mRNA在正常犬乳腺组织中的相对表达量与其在良性乳腺肿 较，差异极显著(P0．0L)。VEGF mRNA变化范围较大，与 瘤的表达两者之间差异不显著(，O．05)。恶性乳腺肿瘤组织中VEGF 正常犬乳腺组织和良性乳腺肿瘤相比较，差异极显著(P∞．001)．发生了淋巴结转移的犬乳腺 肿瘤其VEGFmRNA相对表达量为与其它恶性犬乳腺肿瘤组织比较差异显著(Po．01)． 2．采用免疫组织化学sP方法法对犬乳腺髀瘤病例中VEGF、PTEN蛋白进行检测，并分析VEGF、 PTEN表达与临床病理特征之间的关系．结果显示：PTEN染色主要定位于增生的乳腺上皮或癌巢 细胞浆，少量可见于核膜染色。乳腺肿瘤组织中PTEN基因表达与犬的年龄、肿瘤大小无关(P0．05X 而与组织学分级和淋巴结转移有关俨O，01)。VEGF染色定位于肿瘤及周围血管，少量肌上皮细胞 浆，乳腺肿瘤组织中VEGF蛋白表达与患病犬的年龄、肿窟大小无关伊O，05)，而与淋巴结转移有 关。 3．从临床收集一犬乳腺癌病例对肿瘤组织其进行原代培养和初步鉴定，将纯化好的肿瘤细胞接种 裸鼠右侧背部皮下，建立异种肿瘤种植模型，用免疫组化的方法检测VEGF在犬乳腺癌裸鼠模型 中的表达情况。结果显示：42天后处死的裸鼠移植肿瘤组中VEGF蛋白呈高表达，与14天和28 天处死的裸鼠相比，两者存在显著性差异(，0．05)． 试验，计算不同药物对肿瘤细胞的抑制率。体外试验结果显示：CTX对肿瘤细胞基本没有抑制作 用，其它两种药物随着浓度的增加及作用时间的延长，抑制肿瘤细胞的增殖效果比较明显。环磷酰 胺在体内试验中抑制肿瘤生长的效果及其显著，硒与环磷酰胺合用的效果与分别单独用药相比，差 异不显著伊nD卵。长春新碱在本试验中未发现有良好的抗肿瘤作用。 关键词：犬。乳腺肿瘤，PTEN，VEGF，实时荧光定量PCR，免疫组织化学 Abstract in tumorsarethemostcommon female hasbeen that MammaryBand neoplasms dogs．It reported the the tunlor andtension andthevascular suppressorgenephosphatase homologdeleted(P1园m or endothelial mutateddeletedin in it growth imman塔，however factor(VEGF)atefrequently neoplasms was littlein clinic．Inordertodeterminewhether in levelof reportedvery veterinaf