Cathepsin K对脂肪细胞分化的影响及其作用机制的研究.pdfVIP

CathepsinK对脂肪细胞分化的影响及其作用机制的研究 中文摘要 目前全世界已经有超过10亿的成人超重，至少有3亿人属于重 度肥胖(BMI30)。肥胖的患病率逐年增加，且呈低龄化倾向。肥胖和 多种疾病密切相关，如高血压、糖尿病、冠心病以及某些癌症等，严 重影响人类健康，并给社会带来沉重的经济负担，成为全球第六大公 共健康问题。 但目前对肥胖的防治方法不多，疗效欠佳，临床上的两类主要药 物：1)食欲抑制剂；2)代谢刺激剂。作用广泛，副作用多，限制 了应用。近年对脂肪组织功能研究取得重大突破，认为其不仅仅是一 个能量储存器官，更重要的是具有内分泌功能。通过靶向干预脂肪组 织治疗肥胖成为国内外众多学者研究的热点。本文针对课题组前期通 过蛋白质组学技术筛选出的肥胖与正常人群差异蛋白Cathepsin K(CTSK)，对其与脂肪细胞分化的关系进行初步的探讨。首先运用免 疫印迹方法证实CTSK在3T3．L1细胞中确有表达，并且随着脂肪细 胞分化进程其表达水平、酶活性逐步增强，至分化成熟其水平也相应 达到高峰；接着通过应用E64、M6P抑制CTSK活性发现整个分化进 程被阻断，且与CTSK酶活性减弱密切相关这一有趣现象。说明CTSK 不只是简单的分化标志而是对脂肪细胞的正常分化发挥重要功能， 参与了脂肪细胞分化调控机制。CTSK是一种半胱氨酸蛋白酶，可以 降解多种细胞外基质如I型胶原等。国外有学者提出细胞外基质变化 可以影响脂肪细胞分化的假说，并已有多项实验结果证实。因此借鉴 这一思路对其具体机制进行探索，发现I型胶原是其发挥作用的重要 靶点：I型胶原主要在前脂肪细胞表达，在分化过程中CTSK对其逐 步降解，这一改变激活脂肪细胞分化的两个重要的转录因子PPAR3, 和C／EBPa，刺激脂肪细胞特异性基因表达，从而推进分化进程。 本文首先在体外证实CTSK在3T3．L1细胞中表达，分布于细胞 质内，在溶酶体中进行酶原激活。首次报道了CTSK通过降解细胞外 基质I型胶原参与脂肪细胞分化的调控机制。尽管本实验结果在某些 方面有待完善和需要进一步实验验证，但为解析细胞外基质与脂肪细 胞分化之间的关系提供了有力的实验依据，并且为将来干预脂肪细胞 分化治疗肥胖提供了可能的靶点，开拓崭新的思路。 K，脂肪细胞分化，肥胖症，I型胶原，PPAR“／， 关键词：Cathepsin C／EBPot MECHANISMSANDEFFECTSoFCATHEPSINKT0 DIFFERENTIATIoN ADIPoCYTE ABSTRACT are Thereareatleast1．1billionadultswho at of hasrisen 312millionwhoareobese obesity present．Theprevalence overthe decade children． manyyoung dramaticallypast especiallyamong for Excess tissueis a increasedrisk adipose accompaniedbydramatically mellitus．The and 2diabetes