薄片牡蛎的核型及18S28S核糖体rRNA基因的染色体定位.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2012年，第 31卷，第 1期，第 20—25页 GenomicsandAppliedBiology，2012，Vol-31，No．1，20 25 研究报告 ResearchReport 薄片牡蛎的核型及 18S-28S核糖体rRNA基因的染色体定位 赵文溪 张楠 王嫣 石耀华 顾志峰 王爱民” 教育部热带生物资源重点实验室，海南省热带水生生物技术重点实验室，海洋生物实验教学中心，海南大学海洋学院，海151，570228 同等贡献作者 通讯作者，wy2005@163．com，aimwang@163．corn 摘 要 以薄片牡蛎(Dendostre0folium)成体鳃组织为材料制备有丝分裂中期染色体标本，对其染色体核型 进行了分析，并运用荧光原位杂交技术(FISH)将 18S一28S核糖体 RNA基因定位于中期染色体上。FISH探针 是通过 PCR扩增介于 18S一28SrRNA基因之问的ITS和 5．8SrRNA基因序列，并在 PCR扩增过程 中掺入 了 Biotin一1卜dUTP进行生物素标记 。结果显示，薄片牡蛎的单倍染色体数 目为n：10，全部为中部着丝粒染色 体。与大多数 己知巨蛎属牡蛎的染色体核型相似 。ITS探针在薄片牡蛎中期分裂体相上产生两簇 FISH信号， 分别杂交于 2号染色体短臂的近端粒区域 。本研究首次报道了薄片牡蛎的中期染色体核型以及 18S一28S核 糖体 RNA基 因在染色体上的定位。 关键词 薄片牡蛎，染色体，核型，荧光原位杂交，18S一28SrRNA基 因 KaryotypesandChromosomalMappingofMajorRibosomalrRNAGenes intheLeafOyster(Dendostreafolium) ZhaoW enxi’ ZhangNan W angYan ShiYaohua GuZhifeng WangAimin KeyLaboratoryofTropicalBiologicalResources，MOE，HainanKeyLaboratory ofTropicalHydrobiologicalTechnology,MarineBiologyExperiment TeachingDemonstrationCenter，OceanCollege，HainanUniversity，Haikou，570228 Theseauthorswhocontributedequally Correspondingauthor，~2005@163．com，aimwang@163．com DOI：10．3969／gab．031．000020 Abstract KaryotypeandchromosomallocationofthemajorribosomalRNAgeneswerestudiedintheleaf oyster(Dendostreafolium)usingfluorescenceinsiuthybridization(FISH)．Metaphasechromosomeswereobtained rfom gilltissueofadultoysters．ProbeswerepreparedbyPCR amplificationfrom theinternaltranscribedspacers (ITS，containingthe5．8SrRNA genes)betweenthe188and28SribosomalRNA genes，andlabeledbyPCR incorporationofBiotin一1卜dUTP．Theresultsshowedthattheleafoyster(D．folium)hadahaploidnumberof10 chromosomeswithakaryotypeoftenmetacentricchromosomes(10M)，whichwassimilartomostspeciesin genusCrassostrea．FISH withtheITSprobesgenerated wt osignalspermetaphase，whichwerehybridizedtothe telomereregionsoftheshortarmsofchromosome2．Thissutdyisthefirstreportofkaryotypeandchromosomal assignmentofthemajorRNAgenesinD．folium． Keywords Leafoyst