vMIPⅠ激活Jurkat细胞抗HIV基因表达的研究.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2012年，第 31卷，第2期，第 117—122页 GenomicsandAppliedBiology，2012，Wol-31，No．2，117—122 研究报告 ResearchReport vMIP～I激活Jurkat细胞抗 一HIV基因表达的研究 尹小菲 1 陈彬 2 谭晓华 2 罗燕 杨磊 1杭州师范大学，生命与环境科学学院，杭州，310036；2杭州师范大学，医药卫生管理学院，杭州，310036；3新疆地方病与民族高发病省部共建 教育部重点实验室，新疆石河子大学生命科学学院，石河子，832002 通讯作者，yanglei62@yahoo．com 摘 要 本研究通过构建真核表达载体 pEGFP—N3一vMIP—I，电穿孔法将其转染至Jurkat细胞，荧光定量 PCR检测vMII一I基因对 Jurkat细胞 内CCL5、APOBEC3G、APOBEC3F、等抗 一HIV基因表达水平的影响， 从而探讨 vMIP—I抗HVI感染的机制。结果显示：成功构建了pEGFP．N3一vMIP—I载体，电穿孔转染效率达到 40％左右，与转染空载体组相 比，vMIP—I转染组的Jurkat细胞内CCL5、A3G、A3F和MX1分别上调7．37倍、 1．58倍、2．42倍和2．06倍。研究结果表明：vMIP—I基因可激活Jurkat细胞内一些抗HIV相关基因的表达，这 可能是vMIP-I基因抗H1V感染的机制之一。 关键词 KSHV，抗 一HⅣ 基因，vMIP—I，Jurkat StudyonUp—RegulatedExpressionsofAnti-HIV GenesbyvMIP— Iin JurkatCell YinXiaofei ChenBin TanXiaohua。 LuoYan YangLei 1CollegeofLifeandEnvironmentalSciences，HangzhouNormalUniversity，Hna gzhou，310036；2 CollegeofMedicineandHealthManagement， HangzhouNormalUniversity，Hangzhou，310036；3LaboratoryofXinjiangEndemicnadEthnicDisease，CollegeofLifeSciences，Shihezi，832002 Correspondingauthor，yanglei62@yahoo．com DOI：10．3969／gab．031．000117 Abstract In thisstudy，throughtheconstruction ofeukaryoticexpressivevector，therecombinantplasmids pEGFP-N3一vMIP—1wastransfectedintoJurkatcellsbyelectroporation．Then，byQRTP·CR technique，we detectedtheexpressionlevelsofanti—H1V genes：CCL5，APOBEC3F，MX 1inJurkatcellswhich influencedby vMIP— I geneandexploredthemechanismsofvMIP—I againstHIV infection．Theresultsherecombinant plasmidsofpEGFP-N3——vMIP——1wassuccessfullyconstructedandelectroporationtransfectionefficiencyreached about40％．Incomparisonwithnon—transfectedgourp，thetransfectedvMIP—IgroupcanincreaseCCL5，A3G， A3F，andMX1ofJurkatcellsby7．37，1．58，2．42and2．064timesseperately．TheresultssuggestvMIP—Ican activateexpressionsofsomerelativeanti-HIV genesinJurkatcells，whichprobablyisoneofthemechanismsfor anti．HⅣ infection． Keywords KSHV，Anti-H1V genes，vMIP—I，Jurkat 人获得性免疫缺陷病毒(HIV)和艾滋病(AIDS) ssedandsecreted)、MX1(myxovirus—re