白癜风与CTLA4基因外显子1AG49多态性研究.pdf

中文摘要 A／G鹌多态性研究 攘 要 目的：白癜风是一种以色素脱失为特征的常见皮肤 瘸。自癜风的病因尚未瞬确，但存在许多假说胃蔽解释 皇癜风的病因：神经化学因子学说，黑素缨胞自身破螺 学说和自身免疫学说。这些假说并不互相排斥，比较容 易理解的是联合假说，即其他机制造成黑索细胞破坏之 后，产生抗黑索细胞抗体，进一步弓l起自身免疫反应。 有关自癜风免疫学方嚣豹硪究已骞缀多投道。自癜风的 发病存在遗传易感性，超过20％的患者有阳性家族史。 有研究报道白癜风与特定的人类自细胞抗原(HLA)型 剃有关，但还未发现该病与MHC．I类或ll类等谴基因 闻鸯稳定熬楣关性。如果从菜静程度上认为自癜风是一 种自身兔疫性疾病，那么造成自身免疫发生的遗传易感 性因子或许影响自癜风的发病。T淋巴细胞的免疫反应 状态是由免疫刺激信号和兔疫抑制信号之间榻互作用决 定的i一些是身免疫性疾病的磅究发现：B缨膣产生自 身抗体有赖于CD4+T细胞的活化。研究证实，细胞毒T 一种细魅表瓣分予，参与T缨胞的调节。CTLA4与 CD28竞争B7配体，向T细胞佑递负性信号，影响T细 胞的增整，细脆因子的产生和免疫反应。在C亿A《基 中文摘要 因敲除的小鼠模型中研究发现。夸鼠体内T细胞在失去 CX秘“抑翱作用后鼯形成过凌增蘧和滔纯，发展藏致死 性的自身反应性淋巴细胞增殖性疾病，照示CTLA-4在 抑制T细胞过度激活中的作用。CTLA-4的基因变异或 其表达障碍均可引起其功能改变，导致免疫负性调节作 用减弱，可麓弓|发自身免疫性疾病。蔼CT“灌基因静 多态性可能遥过改变CTLA-4蛋白的表达或功能而导致 个体自身免疫性疾病的易患倾向不同。目前已发现 多态性；乡}显子l第17鬻码予49位点A／G多态性：外 重复序列。新近研究发现，CTLAl4基因多态性与一些自 身免疫性疾病相关，表明CTLA-4基因或许是自身免疫 链疾病豹普遍易感性基因。有掇遭贸己Ao基因外显予l 第49位A／G多态性与Grave’s病和I型糖尿病相关。目 前国内外尚无自癜风与CTLA_4基因外显子lA／G49多态 性相关性的研究报道。由于白癜风与自身免疫链疾病密 切楣关，并且缀可能就存在自身免疫，掰鼓我稍对 C札Ao基因外显子l第49位A／G多态性进行磅究，欲 探讨该多态性是否与白癜风的遗传易感性有关，并为进 一步研究CTL小4．Ig是否可应用予白癜风的临床治疗提 供科学依据。． 材料与方法；本实验采用病例。对照研究方法对自癜 风与CTLA_4基因第1外照子～G49多态性的相关性进行 第四医院皮肤科门诊就诊的自癜风恣者59铡。诊断均搬 巾文摘要 据患者的病史、临床表现和查体，并依据朱文冗等提出 的白激风的诊断标准。其中男性患者24例、女性患者35 铡；患者年龄涛9-66岁，平均必29岁；瘸鬻0．5《44 月，平均必44月；进展期43铡，稳定期16铡；同时伴 发其他一种或多种自身免疫性疾病者14例，不伴发其他 自身免疫性疾病者45例。124例正常对照者为河北地区 与患者无斑缘关系的隧机健藤志愿者。其中勇67铡，女 57例；年龄为18--60岁，平均年龄为30岁；均为汉族。 在征得患者本人或其家属同意后，无菌操作下采集新鲜 外周静脉血5ml，．采用Miller’s蛋白酶K法提取基因组 CTA DNA。第l辩显子序弼设计上游弓|物为5-GCT CTTCCTGAAGAC CTC CT-3’，下游弓|物为5’一AGT ACTCACCTTT∞AG-3’。以基因组E瞳tA为模板，用 第49位多态性位煮)。PCR反庶体系及萁循环参数参照 有关文献，反应在KR扩增仪中进行。具体反应体系为 15“l：灭菌去离子水9．2gl， 10×PCR缓冲液1．5¨l，2 mmol／L 1．5 dNTPsnl，25 gmol／L引物各0．3gl，Taq酶 (5饼111)0．2西，模摄DNA