受水稻纹枯病菌诱导表达OsWRKY基因克隆及初步分析.pdf

受水稻纹枯病菌诱导表达OsWRKY基因的克隆及初步分析 专 业： 遗传学 硕士研究生： 张道伟 指导老师： 许新萍副教授 摘要 水稻纹枯病是水稻三大病害之一，近年来纹枯病危害面积迅速扩大，危害程度急剧加重， 已严重影响水稻的产量和品质，因此对水稻纹枯病的防治已迫在眉睫。由于引起水稻纹枯病 solani 的立枯丝核菌(RhizoctoniaKohn)具有强腐生性和宽寄主范围，利用传统方法很难找 到较高水平的抗源，给水稻纹枯病的抗性研究带来一定的困难，因而目前国内外还未深入展 开纹枯病的抗病机制和遗传育种研究。 探讨转录因子在植物防御系统中的功能成为近年来的研究热点之一。在植物中发现的 长发育、新陈代谢及对生物或非生物胁迫的应答反应。 本论文在水稻纹枯病菌侵染12小时的水稻组织中克隆出西舰j∞4基因的eDNA，继而 病防御反应中的作用打下基础。 本研究首先对纹枯病的抗性鉴定方法进行了改良。利用文献报道的3种抗性鉴定方法接 种水稻，发病率不高，病情也轻重不一。而采用本实验室改进的抗病鉴定方法一菌条法接种 水稻叶鞘可达到100％发病率，而且病情比较均一，重复性高，能满足实验室的抗病鉴定需 要。然后以水稻品种日本晴为材料，用水稻纹枯病菌强致病菌株AG．1．认进行接种，12小时 1 片段则可能是由于引物错配得到的非目的片段。为进一步研究克隆所得到的WRKY基因的功 能，用Northel11blot技术对伽眦Ky刀基因进行了表达谱分析。 OsWRKY74基因在水稻抗纹枯病信号途径中可能存在着重要的调控作用。 关键词：水稻，WRKY转录因子，纹枯病，RACE，基因克隆 H OsWRKY and of GeneInducedRhizoctonia CloningPrimaryAnalysis by SolaniainRice Speciality：Genetics Name：Daowei Zhang Xu Supervisor：AssociateProf．Xinping ABSTRACT RhizoctoniaSolaniaisone maindiseasesinriceallovertheworld．But Rice ofthree recently withthe and of and ofrice Rhizoetonia∞hnin，the ampliativeaggravatingdegree yield quality US becomemoreandmore it for to ricesheath declinable，andurgent prevent andthe solaRiain the of Solaniiscaut