糖尿病肾病患者晚期氧化蛋白产物与SOD、TNF.DOCVIP

临床医学论文-糖尿病肾病患者晚期氧化蛋白产物与SOD、TNF ??????????? 作者：孙丽娜, 吴志贤, 张胜利, 林忆阳, 李春梅, 薛耀明?? 【关键词】? 糖尿病肾病；,晚期氧化蛋白产物；,超氧化物歧化酶；,肿瘤坏死因子 　　摘要:? 目的? 研究糖尿病肾病患者血清蛋白氧化损伤指标晚期氧化蛋白产物（AOPP）的改变及其与超氧化物歧化酶（SOD）、肿瘤坏死因子α(TNFα)的关系，探讨蛋白氧化损伤与糖尿病肾病氧化应激状态和炎症因子的关系。? 方法? 糖尿病患者85例，根据尿微量白蛋白排泄率和肌酐水平分为无肾病(DM)组、早期肾病(DN3)组、临床肾病(DN4)组、终末期肾病(DN5)组。用WitkoSarsat介绍的方法改进后分别测定各组的血清AOPP，黄嘌呤氧化酶法测定SOD，ELISA方法测定血清TNFα。? 结果? DN5组患者的血清AOPP(117.8±64.8)μmol/L和DN4组的血清AOPP(80.0±23.0)μmol/L显著高于DM组(58.2±17.7)μmol/L（P0.01）；DN3组血清AOPP(72.7±17.2)μmol/L与DM组比较无统计学意义。血清AOPP与SOD显著负相关（r=-0.217，P0.05），与TNFα无明显相关性(r=-0.064，P0.01)。? 结论? 临床糖尿病肾病患者的血清蛋白氧化较无糖尿病肾病患者增强，并且与糖尿病肾病氧化应激状态有关，但与炎症因子TNFα无明显关系。 　　关键词:? 糖尿病肾病； 晚期氧化蛋白产物； 超氧化物歧化酶； 肿瘤坏死因子α 　　研究发现氧化应激与糖尿病肾病的发生发展密切相关[1]。氧化应激所致蛋白氧化损伤可能在糖尿病血管并发症中有重要作用意义。Kalousova等发现，从2型糖尿病的启动到临床发病的多年时间中，当轻度高血糖导致氧化应激后，蛋白氧化损伤就已经发生[2]。在肾脏疾病患者，氧化应激可促进单核吞噬细胞活化，介导炎症因子释放，导致蛋白氧化损伤[3]。因此，可能糖尿病肾病患者的蛋白氧化损伤是逐渐加重的，且与炎症因子有关。笔者检测不同时期糖尿病肾病患者血清蛋白氧化损伤指标晚期氧化蛋白产物（AOPP）水平，并观察其与血清抗氧化系统的指标超氧化物歧化酶（SOD）、炎症因子肿瘤坏死因子α(TNFα)的相关性，探讨蛋白氧化损伤与糖尿病肾病氧化应激状态和炎症因子的关系。 　　1? 对象与方法 　　1.1? 对象? 按照1999年WHO糖尿病诊断与分型标准，选择南方医院内分泌科2型糖尿病住院患者85例，男性38例，女性47例；其中尿微量白蛋白排泄率（UAER）＜30 mg/24 h为无肾病组（DM组），UAER持续30～300 mg/24 h为早期肾病组（DN3组），UAER＞300 mg/24 h为临床肾病组（DN4组），血清肌酐（Cr）＞445 μmol/L为终末期肾病组（DN5组）。排除急、慢性感染和急性心脏、肝脏、胃肠道及脑血管病变患者；排除原发性慢性肾小球肾炎和其他继发性蛋白尿疾病如高血压肾病、慢性肾盂肾炎、系统性红斑狼疮性肾病等。患者进入研究1月未服用抗氧化剂如维生素E、维生素C。各组年龄、病程、体质量指数（BMI）比较见表1。 　　表1? 4组患者的临床资料（略） 　　Tab 1? Clinical characteristics of the study population 　　除性别为例数外，其余数据为x±s.? DM:无肾病；DN3：早期肾病；DN4：临床肾病；DN5：终末期肾病；UAER：尿微量白蛋白排泄率（(正常值：30 mg/24 h)；Cr：血清肌酐（正常值：66～133 μmol/L). 　　1.2? 试剂与设备? 冰醋酸,碘化钾溶液1.16 mmol/L，氯胺T，迭氮钠磷酸盐(NaN3)缓冲液(pH 7.0)，三氯醋酸(TCA)溶液0.61 mmol/L，试剂均购自原第一军医大学试剂中心。黄嘌呤，黄嘌呤氧化酶 0.25 mg/mL，[5,5’二硫代双(2硝基苯甲酸)]（DTNB）显色液 1.0 mmmol/L，GSH溶液 1.0，均购自美国Sigma公司。化学发光增强剂lucigenin 2 mmmol/L购自美国Molecular Probe公司；人血清新喋呤 ELISA试剂盒96T购自德国IBL公司。分光光度计(T680,上海分析仪器厂)。化学发光仪(Wallac 1210,芬兰LKB公司)。自动酶标分析仪（Multiskan Mk3,美国Thermo公司）。 　　1.3? 方法? 受试者清晨空腹采静脉血2 mL,室温静置1 h内离心10 min(2 000 r/min),取血清避光保存于-70 ℃冰箱待测,所有标本一次测定。 　　1.3.1? AOPP测定? 按文献[3]的分光光度计法加以改进：血