葡糖酸醋杆菌鉴定及红茶菌中细菌纤维素的合成.pdfVIP

摘 要 红茶菌是一种流传于民间具有保健功能的酸性饮料，因其清香可口，制作简便， 而且具有多种保健功能，一直很受人们的青睐。国内外学者研究红茶菌所用的材料多 是来自于民间，民间红茶菌菌株大都没有经过纯化，菌种混杂，易染杂菌，造成红茶 菌液成分的波动，不利于红茶菌的生产和推广。近期出现用纯菌株混合培养红茶菌的 研究，解决了上述问题，但是对红茶菌中的主要发酵菌株葡糖酸醋杆菌的菌种鉴定文 献报道较少，本文对从不同样品中分离出来的 18 株葡糖酸醋杆菌进行了分子鉴定， 鉴定结果表明，18株菌均属于汉逊氏葡糖酸醋杆菌。 静止培养的红茶菌液体表面悬浮着一层膜状物，这层膜状物是红茶菌中的葡糖 酸醋杆菌在酵母菌的促进下合成的细菌纤维素（Bacteria cellulose, BC）。BC是一种 新型的生物材料，与植物纤维素相比，具有许多优良的特性：高聚合度、高结晶度、 高抗张强度、强持水性、良好的生物可降解性等，在食品、造纸、医药及医学生物工 程等工业领域具有广阔的应用前景。 但是细菌纤维素的产量较低， 难以满足工业需求， 因此如何提高细菌纤维素的产量成为众多学者研究的焦点。 本文用两种方法发酵合成 BC，即红茶菌静止培养和葡糖酸醋杆菌单菌株发酵。 分别研究了这两种方法合成 BC 的最佳条件。在红茶菌合成 BC 的实验中，主要研究 了温度、碳源、茶叶种类、茶叶用量、接种量、种龄、装液量等因素对红茶菌合成  BC 的影响。静止培养 22 天后，取样测量残糖量、BC产量及产率。发现红茶菌合成  BC 的最佳条件为温度 30℃，碳源为葡萄糖，茶叶种类为绿茶，茶叶用量为 4g/L，接 种量为 10%，种龄为 60h，装液量为 250mL 三角瓶中装 75mL 的培养液。这些最佳参 数和红茶菌液的培养相一致。因此，这种纯菌种培养红茶菌技术可以应用于生产高质 量及高产量的 BC 以及高质量的红茶菌饮料。 在葡糖酸醋杆菌单菌株发酵合成 BC 的实验中，主要研究了温度、装液量、种龄、 接种量，培养液的初始 pH、培养方式等因素对合成 BC 的影响。静止培养 7 天后， 取样测量培养液的残糖量，BC 的产量及产率。结果发现葡糖酸醋杆菌合成 BC 的最 佳条件为温度 30℃，装液量为 250mL 三角瓶中装 100mL 的培养液，种龄为 36h，培 养液的初始 pH 值为 5 至 6，培养方式为静止培养。 上述所用的两种合成 BC 的方法各有利弊。采用红茶菌合成 BC 的方法，既可以 得到 BC，又可以获得红茶菌饮料；能够充分合理的利用资源，对环境无污染，而且 得到的 BC 品质较好；但是这种方法培养周期长，BC 产量较单菌株葡糖酸醋杆菌发 酵合成 BC较低。采用葡糖酸醋杆菌单菌株合成 BC方法的缺点是：发酵培养后的培 养液恶臭难闻；排放大量的废水。固然这种方法有诸多缺点，但是它的培养周期短， I  而且产量较高，能满足工业的大量需求。因此，在实际的生产中，可根据具体的需求 而选择适当的方法。 关键词： 汉逊氏葡糖酸醋杆菌 菌种鉴定 红茶菌 细菌纤维素 II  Abstract  Kombucha is a kind of folk acid health drink with many beneficial effects to human  health.  Because  of  its  fragrance,  simple  making  and  a  variety  of  health  functions,  Kombucha has been very popular with people of all ages. All along, the domestic and  foreign scholars have studied kombucha with materials usually from folk, but the strains in  this  material  usually  hadn’t  been  purified  and  identified.  So  the  sa