开花启动基因LEAFY转化甘蔗的研究.pdfVIP

摘要 本研究利用根癌农杆菌介导的转化方法，对3个甘蔗品种进行了 LEAFY基因的转化。在对影响根癌农杆菌转化甘蔗效率的多种因素进行 比较研究后，发现选择受体组织的合适生理状态、受体组织在转化前预 培养、超声波处理和添加乙酰丁香酮均可提高根癌农杆菌转化甘蔗的效 率。并据此建立了根癌农杆菌介导的甘蔗转化和再生系统。／将甘蔗心叶 愈伤组织用根癌农杆菌LBA4404咋IBIL感染后，筛选出抗性愈伤组织， 并获得转化植株。其中抗性愈伤组织获得频率最高达9．09％，抗性植株 产生频率最高达1．04％。GUS染色、转基因植株总DNA的PCR及 PCR．Southern杂交检测等结果表明，T．DNA上的外源基因已整合进了转 基因植株基因组中．， 本研究同时以甘蔗心叶愈伤组织为受体，通过PDS—1000氦气基因枪 轰击，将LEAFY基因转入甘蔗细胞。在对预培养、甘露醇高渗处理等 影响基因枪法转化甘蔗的几个因素进行探讨之后，建立了适于基因枪介 导的甘蔗遗传转化和再生体系，并进行了大量转化。获得了抗性愈伤组 织并分化成苗。 转LEAFY基因甘蔗植株的获得，为研究LEAFY基因在不同植物中 —h 、——一 的表达提供了科学依据。『并且为今后进一步开展通过基因工程手段，诱 导甘蔗开花研究打下了良好的基础一 关键词 甘蔗 基因 遗传转化7农杆菌。基因枪V ofLEAFY The OnTransformation Study In Gene Sugarcane Abstract forthe used were Three varieties genetic sugarcane LBA4404 transformation tumefaciens Agrobacterium byusing and markerofNPTIIand LEAFY selectable containinggene gene infectedand theleafof were from derived GUS．Calli sugarcane with at cocultured logarithmicphase． Agrobacteriumtumefaciens was tothe The transformation 9．09％according highest frequency ofKanresistantcalli estimation