宁夏枸杞细胞系的建立及离体筛选耐羟脯氨酸HYP细胞变异系的研究.pdfVIP

摘 要 娜，。(、。，二、rbarumL.)属茄科，是多年生落叶灌木，也是宁夏地 区主要经济树种之一 随着近年来构把药用保健价值的进一步开发，栽培面 积不断扩大，常规育种方法已不能满足现代农业对构把品种改良的需求.70 年代发展起来的植物组织和细胞培养技术，为作物杭逆品种的漆育提供了新 的手段.植物组织或细胞培养结合理化因素的处理，可大大提高变异的范围 和频率.而且，组织和细胞培养便于操作和控制，成本低，周期短，所以利 用此项技术筛选植物抗性突变体近来受到国内外学者的广泛重视.据此，我 们研究建立了由构祀成熟胚诱导的愈伤组织而分离单细胞，进行悬浮培养的 实验体系，并以此为墓础用脯氛酸类似物— 在脯氮酸L-Hydroxyproline (HYP)筛选出构祀杭在脯氛酸变异体，试图为构把生物技术育种提供技术和 方法.泣 本试验以宁夏农科院选育的新品种宁祀 I号三年生树为试材，选取授粉 后 18d的幼果，消毒，在无菌条件下，剖取成熟胚为外植体，接种在含不同 激素的ms培养墓 (附加30%蔗糖)少 主要研究内容为:(1)影响构祀悬浮 培养细胞系建立的因素 外植体胚不同时期形态发育观察;b.不同激素 浓度对愈伤组织诱导率 响;C.悬浮细胞培养继代时间、温度的影响分(2) 胚状体发生过程的研究;b.不同激素浓度 影响构祀单细胞再生的因素3龟· sr.Fnr,K俞伤组织诱导率的影响;C. 胚状体诱导及其萌发过程中激紊配比的影 响;d.激素浓度对单细胞再生植株的影响.然后，以此研究为基础，用上述 构祀成熟胚诱导的胚性愈伤组织为材料，研究了:(1)60C。一Y射线诱变处理 对愈伤组织的影响;(2)耐在浦孰酸(HYP)愈伤组织变异系的筛选爪3)耐 HYP愈伤组织变异系的耐益性及德定性分析;(4)耐 HYP愈伤组织变异系生 理生化特性;(5)变异系的分化和再生苗期生理生化特性.了通过研究主要获 得以下结果: 又 1.由构祀成熟胚诱导愈伤组织，建立了构祀穗定的细胞系，单细胞的愚 浮培养并获得完整植株，移栽成活14株; 2.胚性愈伤组织经30Cy的 ac‘。一Y辐射处理，在含 16mmo1/LHYP选择 培养基和无HYP培养基上交替培养4代，分离出耐HYP的愈伤组织变异体. 该变异体游离脯孰酸含童比对照高 3.3倍;其再生植株叶片游离脯氛酸比对 ”高”’·10. 关键词: 植株再k离体筛了 HYP耐性 丽氛酸了耐盐性 致 谢 本文是在导师马锋旺和钟牲元研究员精心指导下完成的。导 师们严谨的治学态度、勤奋敬业的精神和宽厚待人的优良品德， 都是我今后人生的榜样。在此对导师们在我攻读硕士学位期间的 悉心培养和指导表示衷心感谢。 本文是宁夏回族自治区科委重点研究项目970117014的部分内 容。宁夏回族自治区科委在资金上的资助，使得该项研究得以付 诸实施。 在论文完成过程中，得到了李嘉瑞教授、王跃进教授、范崇辉 教授、任小林副教授、奢占魅研究员，李润准高级农艺师等的宝 贵建议及热情指导.宁夏农科院园艺研究所张一鸣研究员、刘效 义研究员及王春良副研究员为本试验提供了供试构祀品种，并在 试验设计、试材选取等方面给予热情指点。同时，在论文试验实 施过程中得到了任玉芬老师、:效东老师、曹有龙博士、张军科 博士等指导和帮助以及项目组所有成员的参与和支持。在论文写 作过程得到了徐凌飞..黄文江、阮仕利等同学的帮助。 宁夏农科院、宁夏农科院园艺所的领导和同志们也给予我极大 的支持，为我提供了充裕的学习时间及工作上的便利。 在此，谨向所有关心、支持和帮助我的师长、同志、朋友和亲 人致以最真挚的谢意1 胡博然 2000年 11月 缩写词 (Abbreviation) ‘ B ‘ 曰 -