超微和普通生脉散对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用和机制的比较研究.pdf

中文摘要 背景 心肌细胞发生缺血再灌注损伤(RI)时，细胞的钙调控发生改变，肌浆网的 钙摄取功能和肌膜钙ATP酶受到抑制，钙离子在细胞内蓄积，形成钙超载；细胞 内过多的钙离子可激活胞内的磷脂酶A2，使细胞膜磷脂分解，由黄嘌呤氧化酶 途径生成大量的氧自由基，后者直接造成心肌细胞损伤，所以细胞内的钙超载和 氧自由基产生增多是造成损伤的重要原因。 心肌缺血再灌注损伤最常见的表现包括心肌酶谱的变化、各种心律失常和心 肌顿抑。西医缺少积极的防治办法，中医治疗能起到一定的疗效。生脉散及其注 射剂是临床广为应用的益气补阴固脱的方剂，其抗心肌缺血再灌注损伤(RI)的 作用备受关注。超微饮片是近年来新研制的一种中药饮片，目前许多研究表明超 微饮片不仅可以替代传统饮片用于临床，而且可以加速药物成分的吸收，减少药 物的剂量。关于超微生脉散在抗心肌缺血再灌注损伤(RI)的作用目前缺少研究。 目 的 1．通过对超微生脉散和普通生脉散抗心肌RI的对比研究，为超微饮片的进 一步研究和开发应用提供理论依据。 2．探索生脉散在抗RI过程中的抗细胞内钙超载作用的调控机制，研究超微 生脉散和普通生脉散对一心flLRl模型细胞内钙离子浓度的影响和对心肌细胞钙调 节蛋白SERCA2、RYR2的mRNA表达的影响。 方 法 1．用结．-}b30min／松开大鼠左冠状动脉前降支的方法造成再灌注损伤模型。 摘取心脏，免疫组化测Bax、Bcl．2和caspase．3的表达。 2．培养sD乳鼠心肌细胞，用缺氧／复氧法造成培养心肌细胞损伤模型，复氧 同时分别给予空白血清冻干粉或含药血清冻干粉，细胞分组同前。分组处理后， 检测钙调节蛋白SERCA2、RvR2的mRNA表达。 结 果 生率较缺血阶段高，并出现了室性颤扑，死亡率25．O％。普通生脉散低荆量组死 亡率11．1％，其它各组无死亡。各生脉散治疗组各种再灌注性心律失常的发生率 均有降低，以超微生脉散中、高剂量组和普通生脉散高剂量组尤为明显，降至 CK．MB也均高于假手术组，但低于模型组，与模型组比较，差异有非常显著性 (p0．01)。 的超微生脉散和普通生脉散相比，各超微生脉散组的MDA值均低于同等剂量的普 通生脉散组的MDA值，两者差异有显著}生(p0．05)。 疗±．RSOD均高于模型组、低刊婿术组，和假手术纽及模型组比较差异均有非常显 o同等剂量的超微生脉散和普通生脉散相比，超微生脉散升高s0D 著性意义(p0．01 的作用更为明显，两者差异有显著性(P0．05)，其中超微生脉散高、中剂量组和普 通生脉散高剂量组的s0D崮咯低于假手术组，但与假手术组比较无显著性差异(P 0．05)。 4．生脉散对Bd．2表达的影响：模型组及各生咏散组Bd-2的表达较假手术组明 显啊氐，与假手术组比较差异有非常显著性意义(p0．01)；同时，各生脉散纽Bd．2 表达均高于模型组，与模型组比较差异有非常显著性意义(p0．01)；同剂量的超微 生脉散组与普通生脉散组相比，超微生脉散组Bcl．2表达均高于普通生脉散组 o (P0．05 表达较假手术组明显增加，与假手术组比较差异有非常显著性意义(p0．01)；同时， 义(p0．01)．同剂量的超微生脉散组与普通生脉散组相比，超微生脉散高、中剂量 兰Rcaspase．3的表达均低于同剂量普通生脉散组，两者比较差异有显著性意义 (P0．05)。 5．超微和普通生咏散对缺氧复氧心肌细胞活力的影响：模型组心肌细胞严重受 损，心肌细胞活力较正常对照组降低，与对照组相比差异有非常显著性意义 辜导啻。} (s0，O】1．预先加一、牛脉静向兽丁田皇、’毒疗细细胎存_活率高于模型钿 常显著性意义(p0．01)。说明生脉散血清可以提高尉致心肌细胞损伤时细胞的活力。 将超微生脉散和普通生脉散相比较，可以发现，同等剂量超微生脉散血清作用强于 1 普通生脉散。 6．超微和普通生脉散对砌心肌细胞内钙的影