促肾上腺皮质激素释放因子CRF对人胶质瘤细胞U87增殖的影响.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写………………………………………………………………………7 研究论文 促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)对人胶质瘤细胞U87 增殖的影响 前言…………………………………………………………………………………………8日lJ舌…………………………………………………………………………………………8 材料与方法……………………………………………………………一9 结果………………………………………………………………………………………··14 附图…………………………………………………………………………l6 附表………………………………………………………………………………………”24 讨论………………………………………………………………………………………··24 结论………………………………………………………………………………………··29 参考文献……………………………………………………………·30 综述 促肾上腺皮质激素释放因子在肿瘤中的表达及影响…………32 致谢……………………………………………………………………………………………··44 个人简历…………………………………………………………………··45 中文摘要 促肾上腺皮质激素释放因子对人胶质瘤细胞U87增殖的影响 摘 要 f．actor，CRF)是一种含有41个氨基酸的下丘脑神经肽，主要是在应激 axis，}玎)A)的功能来发挥协调自主神经系统、内分泌、免疫系统、生 理及行为学的功能。另外，CI强对妊娠分娩、早产、皮肤、消化系统、 心血管系统、生殖系统等具有调节作用。在人类的子宫内膜癌、卵巢癌、 乳腺癌、皮肤癌、肝癌以及中枢神经系统肿瘤等均发现有CRF过度表 达。动物实验模型表明CI心家族在肿瘤增殖、生长、转移等方面起到 一定的作用。CI讧家族神经肽在中枢神经系统肿瘤中的作用目前研究的 还比较有限，特别是在胶质母细胞瘤方面，国内外都没有明确的报道。 以前我们曾经采用免疫组化和R1’-PCR的方法分别证实了CRF的受体 CRFRl能够在胶质瘤细胞中表达。CI强作为肿瘤的一种推动因素，在 胶质瘤的发生发展中一定存在着某种潜在作用。这将在进一步的研究中 逐步得到证实。 目的：胶质瘤是颅内恶性度最高的肿瘤，由于其具有高侵袭性，对 人体的健康危害极大，治疗效果也不理想，从生物分子学的角度对胶质 瘤的发生发展进行研究已经成为热点。CRF作为一种促瘤生长因子在胶 质瘤的发生发展中的作用还没有被明确的阐述。本实验的目的在于观察 体外培养的人胶质瘤细胞U87在加入含有不同浓度的CRF后，U87胶 质瘤细胞的增殖情况，从而探讨ClU对胶质瘤细胞U87细胞的生长起 促进作用。通过此试验为进一步研究胶质瘤的发生及发展提供了新的内 容。 方法：在体外培养胶质瘤细胞U87，设立实验组和对照组，分别采 用3种不同的方法检测CIU对该细胞系增殖的影响。 (1)在不同的培养时间(24小时、48小时、72小时)，利用倒置 显微镜观察实验组和对照组胶质瘤细胞U87的生长状况，判断Cl讧是 否在肿瘤的生长过程中起促进作用。 中文摘要 (2)在实验组细胞培养液中加入不同浓度的CRF，CRF的浓度分 MTT)法检测不同的作用 5dimethy山iaz01．2．y1)一2，5一Diphenyltetrazolium 时间(24小时、48小时、72小时)细胞的吸光度值A，判断不同的CI强 浓度和作用时间对胶质瘤细胞U87增殖的影响，对数据应用SPSSl3．O 统计软件进行分析。 (3)利用酶组织化学法对细胞内线粒体进行染色，通过线粒体染 色的变化来反映CRF在改变肿瘤细胞代谢方面的作用。 结果： (1)通过倒置显微镜观察结果显示：实验组中加入10。7m01／L的 CIu在分别培养24小时、48小时、72小时后与对照组相比，实验