HGF通过P13K／AKT信号通路上调SMMC-7721细胞Mcl-1的表达.pdfVIP

· 132 · 中华肝胆外科杂志 2009年2月第 15卷第 2期 ChinJHepatobiliarySurg，February2009，Vo1．15，No．2 实 验 研 究 HGF通过PI3K／AKT信号通路上调 SMMC一7721细胞 Mcl一1的表达 李沛雨 郭强 李荣 刘娜 董茂盛 【摘要】 目的 探讨 HGF是否上调 SMMC-7721细胞抗凋亡蛋 白Mcl一1的表达以及 HGF是通 过哪条信号途径调节 Mcl1。方法 人肝癌细胞 SMMC一7721进行实验 ；采用 RT—PCR检测 HGF受 体c—Met在 SMMC一7721细胞 的表达情况 ；用 Westernblot方法检测 MAPK和 PI3K／AKT磷酸化 以 及 Mcl一1蛋白的表达 ；用信号通路阻断剂处理 SMMC7721细胞 ，检测 HGF是通过哪条信号途径调 节 Mcl一1。结果 人肝癌细胞 sMMC7721表达 HGF受体 c—Met；HGF能够激活 MAPK、PI3K／ AKT信号转导途径 ；HGF能够上调 SMMC7721细胞 Mcl一1表达 ；进一步用特异 的抑制剂 阻断 MAPK途径后 ，并不能改变 HGF对 Mcl一1的上调作用 ，而阻断 PI3K／AKT途径后 ，HGF对 Mcl一1的 上调作用被抑制 。结论 HGF对 Mcl1的上调作用是通过 PI3K／AKT途径介导的。 【关键词】 肝细胞生长因子 ； SMMC一7721细胞 ； Mcl一1； 信号转导 HGFupregulatesMcl-1expressionthroughPI3K／AKTpathwaysinSMMC7721cellsLIPei— “，GU0Qiang， LiRong，eta1．DepartmentofGeneralSurgery，GeneralHospital0fPLA，Beijing100853，P．R．China [Abstract] Objective ToinvestigatetheroleofMAPK．PI3K／AKTpathwaysinHGF—induced M cl一1 upregulation in SMM C 7721cells． M ethods Theexpression ofc-metwasdetectedbyRT— PCR．SMMC一7721cellswereexposedtoHGF，phosphorylationofMAPK ，AktandMcl1expression wasdetectedbyWesternblot．Results TheSMMC一7721expressedc-met，HGF stimulatesphospho— ralationofMAPK，PI3K／AKTat5minafteraddingHGFandachievesthepeakat2h．Furthermore， HGF up—regulatesMcl一1 expression wasina time—and concentrationdependentmanner in human SMMC7721celIlines．TheupregulationofMcl1inducedbvHGF wasinhibitedwhenPI3kpathway wasabolishedbythespecificinhibitorW ortmannin．However．itwasnotinhibitedwhenMAPK path— waywasabolishedby inhibitorPD98059．Conclusion HGF canactivateboththePI3K andMAPK pathwaysandHGFupregulatesMcl—lexpressionviaPI3K／AKTpathway． [Keywords] HGF； SMMC7721cells； Mcl1； PI3K／AKT 肝细胞生长因子是一种作用广泛的细胞 因子 ， 的研究将探讨 PI3K和MAPK信号途径在 HGF介 对多种组织细胞具有重要的调控作 用，包括刺激细 导的抗凋亡蛋白Mcl一1调控中的作用。 胞增殖 ，促进 细胞迁移及 抑制细胞凋亡等口’。 材料和方法 HG