中华白海豚体内微量元素含量及mtDNA 12S和16S rRNA序列变异与遗传多样性分析.pdf

中华白海豚体内微量元素含量及mtDNA 12S和16SrRNA序列变异与遗传多样性分析 摘 要 珠江口水域是我国现存中华白海豚栖息数量最多的水域，估计有1300头左 右。但是，由于受人为因素和环境污染等原因，每年都有中华白海豚意外致死。 本研究收集了2003年至2006年间珠江口水域搁浅死亡的中华白海豚，对其进行 系统解剖、制作剥制标本和骨骼标本。本研究评估了中华白海豚体内微量元素污 染情况；研究了中华白海豚的遗传多样性并分析不同群体的种群遗传结构，为加 强中华白海豚种群遗传管理，制定有效的保护政策提供科学依据。 本研究测量了珠江口水域(珠海市)12头中华白海豚体内砷(As)、钡(Ba)、 lO种微量元素含量。分析结果显示：受试样品中含量最高的元素是Zn，Cu、Hg 是肝脏和肾脏，其余各组织器官中的微量元素含量分布不尽相同。珠江口水域中 华白海豚对不同微量元素的富集系数(CF)相差很大，Hg最大，达到41862．1， 富集作用，但不同的微量元素有不同的积累特点，Hg、As、Cd、Pb的积累主要 受食物链逐级积累的影响，Co、Cr、Ni的积累主要受生物体自身生理特点的影 响，而Cu、Zn贝,U受两者的影响。与文献报道的中国其它水域中华白海豚体内微 ＼ 量元素含量进行比较，发现珠江El水域的As、Pb比厦门港和广西北海的都要高， 广西北海的Hg、Cd(除肌肉中低于珠江口)含量全部明显高于其它2个海域，Zn、 Cu在三个水域中没有明显的分布差异。评价了珠江口水域中华白海豚体内微量 元素污染程度，认为珠江13水域中华白海豚受到一定程度的As、H昏Cd、Pb污 染，不存在Co、Cr、Cu、Ni、Zn污染，但中华白海豚体内Ba含量应引起关注。 成功扩增了35头中化^白海豚长约447 rRNA序列片断和43头中华白 bp的12S 海豚长约568 rRNA序列片断。在12SrRNA序列中，发现了5个变异位点， bp的16S 定义了2个单倍型，其单倍型多样性和核苷酸多样性分别为0．161士o．079和． 0．00182士0．00089；在2个12SrRNA单倍型中，单倍型A是最常见的，除了厦门群 rRNA 体的XM02、xM05和XM06是单倍型B之外，其余全部都是单倍型A。在16S 基因中，发现了2个变异位点，定义了2个单倍型，其单倍型多样性和核苷酸多样 是单倍型B之外，其余39个个体都是单倍型A。根据mtDNA12S和16SrRNA的变 异情况，中性突变假说在中国水域的中华白海豚群体得不到验证。 分析了12S和16SrRNA序列四种碱基组成，发现存在明显的偏向性，AT含 12S和16S rRNA的基因 量明显高于GC含量(pO．05)。发现中华白海豚mtDNA 突变方式均是转换，说明中华白海豚种内的分化程度很低，目前还没有形成种内 rRNA 分化。而通过计算3个种群间的遗传分化程度，发现基于mtDNA12S和16S 统计获得的Fst和Ost均未达到统计学显著水平，也表明中华白海豚3个群体之间 并没有产生显著的种内分化。 构建了海豚科线粒体DNA12S和16SrRNA的系统发生NJ和UPGMA树，结果 rRNA 都显示中华白海豚的12S 2个单倍型A、B聚类在一起，与真海豚(Delphinus truncatus)距离最近；16SrRNA的单倍型A与宽 detphZs)、宽吻海豚(