贲门腺癌P170蛋白表达的研究.DOCVIP

临床医学论文-贲门腺癌P170蛋白表达的研究 ????????????????? 作者：彭学宏，陈暖，许建衡，林静华，焦晓阳????? 【关键词】? 贲门肿瘤 ??? ［摘要］ 目的:研究并探讨P170蛋白在贲门腺癌组织中的表达及其意义。方法：用流式细胞术检测55例贲门腺癌患者癌组织和距离肿瘤5 cm以上癌旁正常组织P170。结果：55例贲门腺癌组织P170阳性表达率为50.9%,癌旁正常组织未见P170表达，两者差别有统计意义。结论：贲门腺癌组织中具有多药耐药性,检测癌组织P170表达水平对化疗效果有一定意义。 　　［关键词］ 贲门肿瘤；药物耐受性；基因表达；流动血细胞计数　　　Study on P170 Protein Expression in Cardiac Adenocarc Inoma 　　Abstract:Objective To study the expression and signicance of P170 protein in cardiac adenocarcinoma.Methods The expression of P170 protein in 55 cases of cardiac adenocarcinoma was detected by flow cytometry.Results The positive expression rate of P170 protein was 50.9% in 55 cases of cardiac cancer tissue.Normaltissue near cancer has no positive expression of P170 protein.There was an obvious difference between normal and cancer tissue.Conclusion There was multiple drug tolerlance in cardiac adenocarcinoma,detection of P170 protein expression in cancer tissue had significance in evaluation of chemotherapy. 　　Key words：Cardiac neoplasms；Drug tolerlance；Gene expression；Flow cytometry 　　耐药现象是肿瘤化疗所面临的最常见和最棘手的问题，其结果是肿瘤病人对化疗无效，降低病人的生存期。多药耐药性（MDR）是指抗某种细胞毒药的耐药细胞对许多结构上无关和作用机制上不同的其他细胞毒药物产生交叉耐药。产生MDR的分子基础是人的mdr1基因高表达引起P170蛋白表达增强，本文应用流式细胞术检测P170蛋白，研究并探讨mdr1基因编码的蛋白P170在贲门腺癌组织中的表达及其意义。 　　1材料与方法 　　1.1临床资料? 我院近2年住院手术的贲门腺癌患者55例，男47例，女8例。年龄47岁~76岁。入选标准：术前经胃镜病理活检确诊为贲门腺癌，术前未接受化疗，肿瘤病灶起源于贲门，性别、年龄不限。术中取贲门癌组织及距离肿瘤5 cm以上癌旁正常组织各一块，采用流式细胞术，检测P170蛋白。 　　1.2试剂? 鼠抗人MDR产物，（P170）单克隆抗体（Immunotech公司，法国），FITC标记兔抗鼠Ig（Dako公司，丹麦）。 　　1.3流式细胞仪检测方法 　　1.3.1实体瘤组织单细胞悬液制备? 术中取新鲜贲门癌及距离肿瘤5 cm以上正常癌旁组织0.2 g~1.0 g，以生理盐水洗去血迹，至于重叠的100目铜网和260目尼龙网上，以眼科剪剪成1 mm3碎块，在以眼科镊夹持组织在铜网上轻搓，边挫边以磷酸盐缓冲液（PBS）将搓下的细胞洗入网下的平皿内，直至组织搓完。将收集的细胞悬液以260尼龙网过滤一次去除组织碎块，收入10 ml试管内离心（1 500 r/min，10 min），弃去上清再以PBS漂洗，同前述方法离心2次，均弃上清，备用。 　　1.3.2免疫标记? 标记前用PBS漂洗离心1次（1 500 r/min，10 min）以去除固定剂，再将每分悬液分两管，其一加20 μl P170工作液（一抗），其二加20 μl羊抗鼠IgG（一抗）工作液，室温下20 min，离心（2 000 r/min，5 min），除上清后加1 ml PBS漂洗离心2次，再向上两管中各加20 μl羊抗鼠IgG－FITC、室温避光30 min，离心后去除上清以除去未结合的荧光抗体，以PBS漂洗离心2次，均弃上清，最后加500 μl PBS待检。取少许细胞液图片，在荧光镜下可见P170阳性细胞