复方鳖甲片预防肺纤维化大鼠细胞外基质过度形成的实验研究.docVIP

CBP can modulate the levels of  -collagen,  -collagen, laminin and hyaluronic acid in the serum in which the levels of them increased after injection with bleomycin, to proportion appropriate extracellular matrix remodeling. Conclusion: CBP may play its therapeutic role by leveling down the content of extracellular matrix in rats with pulmonary fibrosis induced by Bleomycin A5. Key words: Compound Biejia prescription; rats; pulmonary fibrosis; -collagen; laminin; hyaluronic acid. -collagen;  肺组织的细胞外基质与肺纤维化关系最为密切 1 2  肺纤维化可由多种疾病引起  致 病因素首先造成肺组织损伤 在此后的修复过程中 细胞外基质成分首先填补损伤肺组织 当其过度沉积时 可形成肺间质纤维化 此病理过程导致肺组织重建 肺结构破坏 肺泡膜 增厚 换气面积减少 最终发生呼吸衰竭 细胞外基质与炎症也有密切关系 3 因此研究 细胞外基质形成对于认识上述疾病的发病机制及对该病诊断 防治具有重要意义 近年来 中医药在防治肺间质纤维化方面取得了较好的效果 并且显示出良好的应用前景 复方鳖甲 片由鳖甲 当归 三七 冬虫夏草 黄芪 板蓝根 连翘等中药组成 本实验室研究表明该 方对肝纤维化有较好的疗效 为了探讨其对肺纤维化的作用 我们以博来霉素 A5 诱导大鼠 肺纤维化模型 研究该方对肺纤维化大鼠细胞外基质的影响 以期为临床防治肺纤维化提供 药效学基础 1. 实验材料 1.1 实验动物 SD 大鼠 70 只 雄性 体重 206 土 16g 实验动物和饲料购自北京维通利华实验动物技 术有限公司 1.2 实验药物 实验动物饲养在洁净级动物房 复方鳖甲片原料粉 即复方鳖甲软肝片原料粉 由内蒙古福瑞制药有限公司提供 批 号醋酸强的松 在本实验中为阳性对照药 广东华南制药厂生产 批号 011201 注射用盐酸博莱霉素 1.3 主要实验仪器 日本化药株式会社制造 批号 X12100 GC-911- -放射免疫计数器 MD 100 半自动生化分析仪 中国科技大学实业总公司 华士信医疗设备集团公司 2. 实验方法 2.1 大鼠肺纤维化模型复制方法 参考陈佰仪等 4 提供的方法 并加以改进 具体操作如下 5%戊巴比妥钠腹腔注射麻 醉 0.25ml/100g 后将大鼠固定 颈部消毒 切开颈部皮肤 逐层剥离 暴露气管 然后 向气管内注入 0.3ml 博莱霉素生理盐水溶液 1.5mg/200g 或 0.9%生理盐水溶液 继续注入 0.3ml 的空气 注后立即将动物直立并旋转 使药液在肺内均匀分布 其中假手术对照组大 鼠肺部注入等体积的生理盐水 正常对照组大鼠不做任何处理 实验期间大鼠自由进水和饮 食 2.2 实验动物的分组和给药方法 SD 大鼠造模后的第 2 天 分别给各组大鼠生理盐水 醋酸强的松 复方鳖甲片原料粉 复方鳖甲片原料粉和醋酸强的松片 在使用时分别用蒸馏水溶解 配成混悬液备用 其中正 常对照组 假手术对照组 模型对照组大鼠分别给予 0.9%生理盐水 给药剂量为 0.014L/kg 强的松组大鼠给予醋酸强的松混悬液 给药剂量为 0.014L/0.56mg/kg 复方鳖甲片高剂量组 复方鳖甲片中剂量组 复方鳖甲片低剂量组大鼠分别给予高剂量 0.014L/1.4g/kg 2 中剂量 0.014L/0.7g/kg  低剂量  0.014L/0.35g/kg  复方鳖甲片原料粉混悬液  每周连续给药 6 天 连续给药 4 周 到第 28 天时 用 1.5%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉 2.5ml/kg 后将大鼠 麻醉固定 腹主动脉取血 分离血清 同时取肺脏做相应的研究 2.3 血清学指标测定方法 将腹主动脉抽出的血液以室温 3000rpm/min 离心 15min 取其上清液即为血清 采用放 免法测血清中 胶原 -C 型胶原 -C 及层粘连蛋白 LN 和透明质酸 HA 的含量 2.4 肺组织羟脯氨酸测定方法 取适量肺组织