两个水稻叶色突变体的鉴定和基因定位.pdfVIP

摘 要 叶色突变体是水稻功能基因组学研究的重要材料。我们在本实验室构建的突变体库中发现了 两个以日本晴为背景的水稻叶色突变体(白条叶突变体stlO和黄绿叶突变体ygl6)，本文对这两 个突变体开展了形态学鉴定、遗传分析、叶绿素含量和叶绿素荧光参数测定以及叶绿体发育形态 的电镜观察等研究，并通过图位克隆的方法对目的基因进行了初步定位和精细定位，为阐明叶色 突变体的分子机制研究奠定了基础。研究结果如下： 1 在水稻甲基磺酸乙酯(ethylmethane 的突变性状，此后随着植株的生长逐渐弱化，至抽穗期叶片颜色基本恢复正常，只有叶脉仍 呈白色。白条性状受温度影响，高温时性状明显，所有突变个体出现白穗现象。低温条件下， 白条较窄，颜色不明显，穗的颜色正常。以培矮64s为母本，突变体stlO为父本构建分离群 体，遗传分析结果表明该突变性状由一对单隐性核基因控制。利用F2分离群体中突变型植株 实验测定了24℃、28℃和32℃三个温度条件下叶绿素含量，发现突变体stlO在32℃条件下 叶绿素a和叶绿素b的含量减少，28℃、24℃条件下变化不明显。叶绿素荧光数据分析结果 显示白条叶突变体的最大量子产额低于野生型。 2 在水稻T-DNA插入突变体库中发现了一个以日本晴为背景的黄绿叶突变体ygl6。该突变体整 个生育期叶色呈黄绿色，分蘖较对照日本晴有所减少，株高较日本晴偏矮，生育期延迟，对 温度的变化钝感。以1892s为母本，突变体ygl6为父本构建群体，遗传分析结果表明该突变 性状为单隐性核基因。利用图位克隆的方法将该基因定位于第10染色体HEl0．HE20两个分 子标记之间89Kb的范围内，左侧4个交换，右侧2个交换。叶绿素含量分析结果表明，该 突变体叶绿素a的含量比野生型下降了36％。叶绿素b下降了94％，类胡萝卜素下降了20％。 叶绿素荧光数据分析结果表明突变体和野生型之间差异不明显。透射电镜观察结果显示突变 体叶绿体的类囊体基粒片层结构比野生型明显减少。 关键词水稻突变体，白条叶，黄绿叶，叶绿素，基因定位 Abstract ail foundtwoleaf Leafcolourmutantis usefulresourceforrice research．Inthis genomics study,we colourmutantsata inourrice leaf backgroundofjaponicavarietyNipponbare mutantand conducted stlO yellowgreenmutantygl6．Wemorphologicalidentification，geneticanalysis， determinationof contentand fluorescence electron chlorophyll chlorophyll microscopy parameters，and of withthetwomutants．Theresultsaresummarizedasfollows： observingchloroplastdevelopment 1．Wefounda leafmutantstlOat which temperature—sensitivewhite·stripe backgroundofNipponbare isinduced methane at