桃过敏原基因定位及其在桃不同组织的表达.pdf

摘 要 J．02． 和抑制蛋白(PVN)这四类过敏蛋白引起，它们的分别命名为n“PJ．厅“P 4，在扁桃中命名为抑材du PruP3和n“P I-4。本研究旨在阐明桃／扁桃过敏原 基因家族成员的基因组序列特征，明确它们在国际参照连锁图谱上的定位，并分 析其与苹果过敏原基因在序列和图谱位置方面的同源性。同时，应用real．time PCR的方法研究桃四类过敏原基因家族18个成员在桃果皮、果肉、花药和叶片 等不同组织中的表达．主要结果如下： 1．本研究克隆得到四类18个桃过敏原基因，分别定位于5个连锁群上．8 个尸r“PJ(尸r“pJ『．DJ—J．酊和3个P，甜P，．06同工型基因，isoallergengenes)基 2基因同 因都定位在第l连锁群(G1)的顶部，其中4个为新发现。5个n“P 3连锁群，mP2．02定位在第7连锁群，胁P 2．03定位在第8连锁群上，竹“P 2．舛基因定位在第l连锁群上．n材P2基因在外显子和内含予上都存在差异， 推导的氨基酸组成都不同。3个n扰P3同工型基因都定位在第6连锁群上。3个 PruP3基因都含有一个内含子和最小长度为10 nt的外显子．办”P4．01和丹“P 4．卯分别定位在第1连锁群和第7连锁群。通过对比桃和苹果的过敏原基因组序 列和它们的图谱定位，结合桃和苹果连锁群的比较基因组同一性研究成果，表明 桃第一连锁群Gl与苹果的LG16和LG8(LG表示苹果属连锁群)、G3和LG9、 G6和LG 12、G7和LG2具有同源基因位点分布的同一性关系(synteny)． 2．应用real—timePCR技术，研究基因组克隆获得候选桃过敏原基因在果皮、 果肉、花药和叶片四种不同组织间的表达水平．结果表明，这些基因成员表达各 异．其中PruP』．DJ、抑“PJ．06B、PruP 4．02五个成 3．01、尸，“P4．01以及尸，甜P 员为主要表达过敏原基因成员。多数过敏原基因在果皮的表达比果肉高。另外， 发现部分基因成员存在组织特异性表达，其中，尸，甜P3．01为桃果实中表达最丰 富的成员，且只发现于果皮中，进一步解释了桃果皮的高致敏性。尸，wPJ．02和 3．03只在花药中表达．这些结果可以为进 PruP3．02只在叶片中表达，而厅甜p III 一步开展鉴别致敏的关键基因和特异位点提供线索，并为选育低致敏性桃品种提 供理论和实践依据。 关键词：桃；过敏原基因；图谱定位；病程相关蛋白；类甜蛋白；脂质转移蛋白； 抑制蛋白；实时定量PCR；基因表达； IV Abstract identified to four The families： peachallergensbelongmainly protein related10 transfer and pathogenesisproteins，thaumatin-likeproteins，lipidproteins familiesare as